Modulación del receptor para fractalquina, CX3CR1, en monocitos humanos por efecto de la interleuquina 10 (IL-10)

RAMOS, M. VICTORIA; FERNÁNDEZ, GABRIELA C; LANDONI, VERÓNICA I; BENTANCOR, LETICIA V; FERNÁNDEZ-BRANDO, ROMINA J; ISTURIZ, MARTIN A; PALERMO, MARINA S

Mar del Plata

Congreso; LI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), LIV Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2006

El CX3CR1 presente en monocitos (Mo) tiene como ligando la fractalquina (FKN), única quimioquina de membrana expresada en endotelio inflamado que actúa como molécula de adhesión favoreciendo el reclutamiento de Mo, población  potencialmente tóxica. Hemos observado un descenso significativo en el porcentaje de Mo CX3CR1+ en los pacientes con Síndrome Urémico Hemolítico (SUH). Por este motivo, nos interesó analizar si el CX3CR1 es modulable  por factores inflamatorios y anti-inflamatorios. Anteriormente, demostramos que LPS y toxina Shiga-1 (Stx1) disminuyen significativamente la expresión de CX3CR1 en Mo. En el presente, analizamos el efecto de la IL-10. Se purificaron monocitos de dadores sanos y luego de los tratamientos, se marcó con anticuerpos y se analizó por Citometría de flujo. El cultivo (20hs) per se, disminuye significativamente la expresión de CX3CR1, efecto que es inhibido por IL-10, en forma dosis dependiente, siendo la concentración óptima 10-20ng/ml (0hs= 80.1±2.3%; 20hs basal= 55.1±5.5%; 20hs IL10=74.8±5.5%)*p< 0.05 vs.0hs, n=8. También se utilizó una línea celular monocítica, THP1, que expresa CX3CR1. Previamente se diferenciaron con PMA (5ng/ml) durante 48hs, para inducir la expresión de CD14. Se incubaron con LPS (100ng/ml), Stx-1 (2.5ng/ml) e IL-10, durante 20hs. Sólo se observó un aumento significativo en la expresión de CX3CR1 en presencia de IL-10. (basal: 65.8±3.9%, mediana 25.7±3; IL10: 82.1±4.5%, mediana: 44.5±9.9)*p<0.05, n=7. Además se observó una disminución en la expresión de CD14 con LPS y Stx-1; y aumento con IL10, el cual también ocurre en monocitos según bibliografía (%CD14: basal= 62.4±3.2, LPS= 44.8±5.1**, Stx-1= 48.8±3.9*, IL-10= 70.9± 3.2*) *p<0.05**, p<0.001 vs basal, n=7. Concluimos que mientras factores inflamatorios presentes durante el SUH, como LPS y Stx disminuyen la expresión de CX3CR1, la IL-10, citoquina antiinflamatoria evita su descenso en Mo e induce su aumento en células THP1.