Gal-8: un factor angiogénico presente en tumores de próstata y mama

CÁRDENAS DELGADO, VICTOR M.; NUGNES, LORENA G.; COLOMBO, LUCAS L.; COMPAGNO, DANIEL O.; TRONCOSO, MARÍA F; CROCI, DIEGO O.; RABINOVICH, GABRIEL A.; WOLFENSTEIN-TODEL, CARLOTA; ELOLA, MARÍA TERESA

Ciudad de Buenos Aires

Jornada; XXVI Jornadas Nacionales de Oncología del Inst. Angel Roffo; 2010

Instituto "Ángel H. Roffo"

<!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:Tahoma; panose-1:2 11 6 4 3 5 4 4 2 4; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:swiss; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:1627421319 -2147483648 8 0 66047 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; mso-bidi-font-size:10.0pt; font-family:Tahoma; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-bidi-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} -->  La angiogénesis, o neovascularización a partir de vasos sanguíneos ya existentes, ha demostrado ser un pre-requisito esencial para el desarrollo y la diseminación de los tumores primarios. Sin embargo, la formación de nuevos vasos sanguíneos en el estroma asociado al tumor no tiene lugar si no está favorecido el balance relativo de señales pro-angiogénicas por sobre las anti-angiogénicas. Galectina-8 (Gal-8) pertenece a una familia de lectinas que unen b-galactósidos cuyos miembros han sido asociados a la cascada de eventos que conducen a la transformación celular y la metástasis. En este trabajo, testeamos a la Gal-8 como posible modulador de la angiogénesis así como su expresión en tumores humanos. Por lo tanto, nuestros objetivos fueron: 1- Evaluar la expresión y localización de Gal-8 en células endoteliales combinando las técnicas de Western Blot, citometría de flujo e inmunofluroescencia; 2- Estudiar la actividad angiogénica in vivo en el ensayo de Matrigel; 3- Examinar el efecto de Gal-8 sobre la formación de estructuras capilares en células endoteliales cultivadas sobre Matrigel; 4- Analizar la inducción de la migración celular por Gal-8; 5- Estudiar la expresión y localización in situ en endotelio vascular de tumores prostáticos y mamarios humanos por inmunohistoquímica. Los resultados de Western Blot demostraron la expresión de la Gal-1 (14,5 kDa), la Gal-3 (29 kDa) y 3 isoformas de la Gal-8 (34, 36 y 38 kDa) en lisados de células BAEC. Este perfil de expresión se confirmó por las técnicas de citometría de flujo e inmunofluorescencia, las cuales mostraron que las lectinas citadas se encuentran en núcleo, citoplasma y asociadas a la membrana de las células endoteliales. En el modelo de angiogénesis in vivo en ratones inyectados con Matrigel, Gal-8 indujo una respuesta quimiotáctica significativa dosis-dependiente (Control=26±1 vs. Gal-8 (500 nM)=158±56, p<0,05, resultados expresados como células CD31+/mm2). En el ensayo de la herida, la Gal-8 produjo la migración de las células BAEC (Control=21±1% vs. Gal-8 (5 nM)=57±2%, p<0,01). Se encontró además que en el ensayo de morfogénesis in vitro las células BAEC y HMEC-1 experimentan la formación de una red de túbulos capilares (Control=100±12% vs. Gal-8 (5 nM)=298±31%, p<0,01) bajo la influencia de la Gal-8 inmovilizada en Matrigel. Además, el silenciamiento de la Gal-8 endógena en células BAEC transfectadas con el siRNA específico disminuyó significativamente la longitud de los túbulos en el ensayo de angiogénesis in vitro (Control=100±15% vs.Gal-8siRNA48h=33±7%, p<0,01). Por último, el estudio inmunohistoquímico reveló que la Gal-8 se expresa en el núcleo y en el citoplasma de las células endoteliales en los vasos sanguíneos adyacentes a los tumores de próstata y mama humanos. Los vasos sanguíneos contiguos al tejido normal correspondiente presentaron el mismo patrón de reactividad. La importancia clínica de la identificación de señales angiogénicas en el cáncer radica en que permitiría el diseño de estrategias terapéuticas independientes del tipo de tumor. En conjunto, estos resultados establecen que la Gal-8 promueve la neovascularización y se expresa en tumores humanos de alta incidencia, sugiriendo que la lectina contribuye al desarrollo de vasos sanguíneos responsable del suministro de nutrientes y la metástasis del tumor primario.