VALIDACIÓN DE LA TÉCNICA DE LA MICROGOTA PARA RECUENTOS EN PSEUDOMONAS FLUORESCENS

SPAGNOLO D.P.; GARCÍA, J.E.; VALLEJO D.A.; PUENTE M.L.; GROPPA M.D.

Encuentro; REBIOS 2019 XII REUNIÓN NACIONAL CIENTÍFICO TÉCNICA DE BIOLOGÍA DEL SUELO; 2019

VALIDACIÓN DE LA TÉCNICA DE LA MICROGOTA PARA RECUENTOS EN PSEUDOMONAS FLUORESCENSVallejo D.A.1; Spagnolo D.P.2; Groppa M.D.3 Puente M.L.1; García J.E.11 INTA, IMYZA, Argentina. 2 UBA, Facultad de Agronomía, Argentina. 3 UBA, Facultad de Farmacia y Bioquímica; CONICET (IQUIFIB), Argentina.En microbiología uno de los métodos para la cuantificación bacteriana es el recuento de viables en placa (UFC/g o UFC/mL), en la cual se siembra 100 μL de diferentes diluciones de la muestra y se requieren tres repeticiones por dilución para obtener resultados robustos. Por otro lado, el método de la microgota, validado por la REDCAI para recuentos de inoculantes a base de Azospirillum, reduce la alícuota sembrada a 10 μL, por lo que se pueden realizar nueve siembras por placa (tres diluciones con tres repeticiones). Nuestro objetivo fue comparar ambas metodologías para el recuento bacteriano de un inoculante a base de Pseudomonas fluorescens, cepa ZME4, la cual fue crecida en medio ER (200 rpm, 28 °C, 36 horas). Se hicieron once ensayos independientes y los resultados se analizaron con ANOVA (medias comparadas con Tukey (p≤0.05)). El recuento promedio de la técnica de placa entera fue 8,3·109 UFC/mL y el de la microgota de 7,5·109 UFC/mL, lo que representa una diferencia de 10% entre ambas metodologías pero que no fue estadísticamente significativa. Como conclusión, el método de la microgota brinda resultados confiables para recuentos de viables de P. fluorescens y presenta la ventaja de ser una técnica más rápida y económica.