Galectina-8 modula la función de las células endoteliales vasculares

VÍCTOR MANUEL CÁRDENAS DELGADO; LORENA NUGNES; MARÍA FERNANDA TRONCOSO; DIEGO CROCI; GABRIEL ADRIÁN RABINOVICH; CARLOTA WOLFENSTEIN-TODEL; MARÍA TERESA ELOLA

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LIV Reunión científica anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Galectina-8 modula la función de las células endoteliales vasculares. V M Cárdenas Delgado1, L G Nugnes1, M F Troncoso1, D O Croci2, G A Rabinovich2, C Wolfenstein-Todel1, M T Elola1 1Instituto de Química y Fisicoquímica Biológicas-uba-conicet2Instituto de Biología y Medicina Experimental-conicet Anteriormente, nuestro grupo demostró que la galectina-8 (Gal-8) actúa como factor proangiogénico in vivo y que, además, se expresa en endotelio vascular de tejidos normales y tumorales. Con el objetivo de validar los resultados que señalan a la Gal-8 como agente proangiogénico examinamos: 1) la localización y expresión en células endoteliales por inmunofluorescencia; 2) la actividad sobre células endoteliales en dos ensayos de funcionalidad in vitro y 3) la presencia de proteínas que interactúan específicamente con la Gal-8 en un extracto de células endoteliales. Los resultados demostraron la presencia de la lectina tanto en núcleo como en el citoplasma de las células BAEC. Estudios de Western Blot y citometría de flujo confirmaron la expresión de la galectina-8. Por otra parte, se analizó por medio del ensayo de la herida la migración de las células BAEC bajo distintas condiciones en respuesta a dosis bajas (1,25-40 nM) de Gal-8 inmovilizada. En esta técnica se introduce una herida en una monocapa de células endoteliales confluentes y se determina el porcentaje de reducción comparando el ancho de la herida al inicio del experimento y a las 16 horas. Se encontró que la Gal-8 estimula la migración de las células BAEC (Control=21,4±1,6% vs Gal-8 (5 nM)=57,8±2,5 %, p<0,01). Se demostró, además, que las células BAEC cultivadas en Matrigel en presencia de dosis bajas (5-20 nM) de Gal-8 inmovilizada experimentan la formación de una extensa red de túbulos capilares (Control=100±12.8% vs Gal-8 (5 nM)=298.1±31.4%, p<0,01). Estos resultados se confirmaron con la línea de células endoteliales HMEC-1 representativa del endotelio microvascular. Finalmente, se logró identificar a CD166 como posible ligando de superficie. Se concluye que la Gal-8 se expresa en células endoteliales vasculares y que actúa como factor proangiogénico, pudiendo constituir una señal difusible cuyo aumento en el microambiente tumoral desencadenaría la neovascularización.