El 17beta-estradiol regula la trascripción y estabilidad del ARNm de las subunidades alfa1 y beta1 de la guanilil ciclasa sensible a óxido nítrico en adenohipófisis

CABILLA JP, RONCHETTI SA, NUDLER SI, QUINTEROS FA, MILER EA, DUVILANSKI BH

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LIV Reunión anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El estrógeno (E2) regula la liberación hormonal así como también la proliferación y la muerte celular adenohipofisaria. La guanilil ciclasa soluble (sGC) cataliza la formación de GMPc y está compuesta por 2 subunidades, a y b, siendo a1/b1 el heterodímero más activo y ubicuo. Previamente mostramos que la administración de E2 causa un efecto opuesto sobre las subunidades de la sGC, aumentando los niveles de ARNm y proteína de la subunidad a1 y disminuyendo los de b1 y la actividad enzimática global. Objetivo: investigar los mecanismos por los cuales el E2 regula diferencialmente la expresión de las subunidades de la sGC en adenohipófisis. Métodos y Resultados: Los cultivos primarios de células adenohipofisarias se incubaron durante 6 u 8 h con E2 10-9M en presencia o ausencia de diferentes drogas. Se evaluaron los niveles de ARNm por PCR semicuantitativa o proteína por western blot de a1 y b1. El tratamiento con E2-BSA (10-9 M, incapaz de atravesar la membrana celular) no modificó los niveles de ARNm de a1 ni b1. El tratamiento con actinomicina D (2 mM, inhibidor de la transcripción) revirtió parcialmente el aumento del ARNm de la subunidad a1 y la disminución de la b1 causado por E2. La cicloheximida (10 mg/ml, inhibidor de la traducción) revirtió completamente el desbalance en la expresión de los ARNm de a1 y b1 inducido por E2. El tratamiento con E2 disminuyó la expresión del ARNm del factor HuR y aumentó la del AUF1 (factores de estabilización de ARNm). Conclusión: el E2 ejerce sus efectos sobre la expresión de las subunidades de la sGC a través del receptor intracelular. Este efecto depende parcialmente de la transcripción y de la traducción de novo de las subunidades y de ciertos factores reguladores. El E2 promueve un ambiente de desestabilización de ARNm que se corresponde con la disminución de los niveles de b1. Estos resultados muestran que la sGC sufre una compleja regulación por parte del E2 y sugieren un papel clave en la fisiología adenohipofisaria.