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Congreso; VI Congreso Nacional de Investigación en Visión y Oftalmología organizado por Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO); 2009

Institución organizadora:

Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO)

Resumen:

Los nucleótidos extracelulares regulan las variaciones diarias en la proliferación de células progenitoras en la retina adulta de pez cebra Ricatti J1, Battista A1, Faillace P1,2 1Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, UBA 2IQUIFIB-CONICET Buenos Aires, Argentina laboneurociencias@gmail.com La retina de los peces teleósteos crece durante toda la vida del animal a partir de una región retiniana llamada zona germinativa marginal (MGZ) que contiene células proliferativas (CP) y en diferenciación. Recientemente, describimos variaciones diarias en el número de dichas células durante el ciclo de luz/oscuridad. La proliferación máxima que se observó en plena fase diurna (L-14 h) desciende a un mínimo en la primera mitad de la fase nocturna (de I-21 a I-02 h). Asimismo, se caracterizó la presencia de las enzimas NTPDasas, que regulan la concentración extracelular de nucleótidos, por inmunofluorescencia en la retina de pez cebra. Los nucleótidos extracelulares actúan como neurotransmisores en el sistema nervioso a través de su interacción con receptores de membrana llamados P. Nuestro objetivo es estudiar el rol de los nucleótidos extracelulares en la regulación de la proliferación celular durante el ciclo de 14/10 h de luz/oscuridad. Los peces cebra (Danio rerio) fueron separados en 2 grupos. Grupo I fue mantenido en un ciclo de luz/oscuridad con una fase invertida respecto del Grupo L. Se efectuaron tres tratamientos con una única inyección intravítrea de: apirasa (una enzima que hidroliza nucleótidos); MRS2179 (un antagonista del receptor P2Y1); o ARL67156 (un inhibidor de NTPDasas). Solución salina o apirasa inactivada fueron inyectados en los ojos controles. Luego de 20 h, a L-14 (fase de luz), I-21 e I-02 h (fase de oscuridad), los ojos fueron tratados con 5-bromo-2-deoxiuridina (BrdU) por 2 h y los animales sacrificados. En cortes de 15 µm se cuantificaron las células positivas para BrdU. De homogenatos de retinas, se realizó RT-PCR utilizando primers específicos de NTPDasas. Los tratamientos con apirasa, MRS2179 o ARL67156 inhiben significativamente el incremento en la actividad mitótica de CP inducido por la exposición a luz a L-14 h. En I-21 e I-02 h, estos tratamientos también disminuyeron significativamente el número de CP. Adicionalmente, demostramos la presencia de las NTPDasas1, 2 y 3 por RT-PCR. Estos corresponden a los principales miembros de esta familia enzimática que se expresan en membrana plasmática. En base a los resultados obtenidos podemos sugerir que los nucleótidos presentes en el medio extracelular regulan las variaciones diarias de las células proliferativas en la MGZ de la retina de pez cebra. Agradecimientos: ANPCyT-PICT2004-Nº25422; CONICET PIP2004 y 2009-Nº6012 y 00169.