Caracterización funcional del rol de nodulinas del tipo NIP en nódulos de Medicago truncatula

NICOLAS AYUB ; CECILIA PASCUAN; ROMINA FRARE; CINTIA JOZEFKOWICZ; GABRIELA SOTO ; SILVINA BRAMBILLA ; KARINA ALLEVA

Rosario

Simposio; Simposio de Genómica Funcional de Plantas; 2017

CONICET

Se conoce como nodulinas, a las proteínas expresadas en nódulos, un órgano especializado en la fijación biológica de nitrógeno de plantas leguminosas en simbiosis con rizobios. En este trabajo comenzamos la caracterización de nodulinas de tipo NIP (Nod26 like intrinsic proteins), subfamilia de acuaporinas vegetales.Primeramente realizamos un análisis evolutivo de las NIPs de 17 genomas de plantas terrestres, a partir del cual dividimos a la familia NIPs en 7 clusters, I-VII. La NOD26 de soja, el arquetipo de la subfamilia, se encuentra dentro del CLI. Luego, mediante el análisis de los microarreglos disponibles de Medicago truncatula, modelo de estudio en este trabajo, en Medicago truncatula Gene Expression Atlas de la Fundación Noble http://mtgea.noble.org/v3/, hemos encontrado 10 acuaporinas expresadas en nódulo maduro, de estas, hubo dos NIPs que presentaron niveles de expresión altos, ambas se encuentran dentro del CLI. Mediante análisis de RT-qPCR y análisis de promotores utilizando al GUS como gen reportero se planteó el estudio de la expresión de ambas proteínas de interés. Mientras su rol funcional en la fijación biológica de nitrógeno se evaluará mediante sobreexpresantes y líneas mutantes. La utilización de genes y promotores caracterizados como herramientas biotecnológicas serán analizados en detalle.