Salida de ATP en eritrocitos humanos frente a péptidos de interés fisiológico y fisiopatológico

GROSS LZF, VENERUS ARBILLA S, LAURI N, ALVAREZ CL, NIEVEZ L., SCHWARZBAUM, PJ, LEAL DENIS F.

La Plata

Congreso; Reunión Anual Safis. 5-7/10/16. Octubre 5-7, 2016; 2016

Los eritrocitos humanos (h-RBCs) liberan ATP al medio extracelular en respuesta a una variedad de estímulosfisiológicos y patológicos. El ATP extracelular (ATPe) resultante puede ser hidrolizado por una o variasectonucleotidasas, lo que resulta en una cinética de acumulación de ATPe. Analizamos esta cinética de ATPe en h-RBCs expuestos a potenciales inductores de la salida de ATP, como el fragmento 1-40 del péptido â-amiloide(Aâ40), la melitina (MEL) y el mastoparán 7 (MST7). Dado que la adhesión a sustratos puede modular la salida deATP de h-RBCs, los experimentos se realizaron tanto en células no adheridas como en células adheridas a poli-Dlisina.Además, se monitoreó el grado de hemólisis para evaluar el componente lítico de la salida de ATP. En h-RBCsadheridos, la exposición a 1,56 ìg/ml de Aâ40 (similar a concentraciones plasmáticas) incrementó la [ATPe] de1,3 ± 0,7 a 2,8 ± 0,5 pmol/106 células, mientras que con MST7 el aumento fue de 1,9 ± 0,4 a 5,6 ± 0,1pmol/106células. En h-RBCs sin adherir Aâ40 y MST7 no indujeron cambios en la [ATPe]; sin embargo, cuando el péptidoAâ40 fue envejecido 72 hs a 37°C, lo que induce la formación de oligómeros, se observó un incremento agudo de17% de la [ATPe], alcanzándose un máximo de 0,32 pmol/106 células. Este aumento correlacionó en gran medidacon un incremento de la hemólisis. Por otro lado, frente a MEL se observó un incremento en la [ATPe] dosisdependiente,con niveles crecientes de hemólisis. Los resultados sugieren que, en GR la adhesión celular es unpre-estímulo necesario para inducir la salida no lítica de ATP por MST7 y Aâ40. Alternativamente, en ausencia deadhesión, se evidencia salida lítica de ATP a altas concentraciones de MEL y con Aâ40 envejecido. Estascondiciones son compatibles con la formación de poros citotóxicos.Con subsidios UBACYT (20020100100090), CONICET (PIP1187 y PIP 639) y ANPCyT (2014-0327), PDTS-CIN 193.