La Galectina-1 aumenta la velocidad de polarización de membranas en las células de hepatocarcinoma humano HepG2

ESPELT, MARÍA V.; RABINOVICH, GABRIEL A.; WOLFENSTEIN-TODEL, CARLOTA; TRONCOSO, MARÍA F

Mar del Palta

Congreso; LIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Las galectinas son proteínas que unen carbohidratos tanto de la superficie celular como de la matriz extracelular. En algunos tipos celulares un aumento de la galectina-1 (Gal-1) se considera signo de progresión tumoral. La invasividad de un tumor es un fenómeno multifactorial que involucra diferentes eventos biológicos, tales como migración y adhesión celular. En este contexto, el primer evento involucra la polarización de las células tumorales. No se ha estudiado aún el efecto de la Gal-1 sobre la polarización en células hepáticas. Para ello, las células HepG2 se incubaron con la Gal-1 recombinante (rGal-1) y los canalículos biliares (CB) se visualizaron por microscopía de fluorescencia utilizando faloidina-TRITC. Los núcleos se tiñeron con Hoechst y la polarización se estimó como la media±error estándar de CB/100 células. A las 24h no se observaron diferencias significativas de las células tratadas con rGal-1 (7 µM) (9±0) con respecto al control (5±2). A las 48h, la rGal-1 aumentó la polarización significativamente (14±1, p<0.05) con respecto al control (8±1). A las 72h, se alcanzó la máxima polarización en las células control (14±2) y en las tratadas (16±1). Luego las células se transfectaron con el plásmido pcDNA3.1-Lgals1 para lograr la sobreexpresión de la Gal-1. Por medio de Western blot se seleccionaron 2 clones (5,5 y 1,5 veces mayor expresión de Gal-1) y se analizó la polarización a las 48h, observándose un aumento similar al informado con la rGal-1 exógena. Mediante dot blot se demostró la secreción de la Gal-1 al medio extracelular en las células control y en las transfectadas. Estos resultados demuestran que la Gal-1 aumenta la velocidad de polarización en las células HepG2 transfectadas así como en las incubadas con la Gal-1 exógena. Además en las transfectadas, la Gal-1 tendría efecto al ser secretada al medio extracelular. Los resultados sugieren un posible rol en la diferenciación hepática durante la embriogénesis o durante la transformación maligna.