Expresión de galectina-8 y sus ligandos en tejido mamario humano

C¨¢RDENAS DELGADO, VICTOR MANUEL; ELOLA, MAR¨ªA TERESA; FRAHM, ISABEL; TRONCOSO, MAR¨ªA F; SALATINO, MARIANA; RABINOVICH, GABRIEL A.; WOLFENSTEIN-TODEL, CARLOTA

Mar del Plata, Provincia de Buenos Aires, Argentina

Congreso; LII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Las galectinas son lectinas caracterizadas por poseer secuencias de aminoácidos consenso y al menos un dominio de reconocimiento de carbohidratos (DRC) con afinidad por beta-galactósidos. La galectina-8 (Gal-8) es un miembro de esta familia aún poco explorado, que existe en varias isoformas bi- y mono- DRC, y que presenta localización citoplasmática, nuclear y extracelular. El objetivo general del presente trabajo es el estudio de la expresión de Gal-8 y sus ligandos en tejido mamario humano. Son nuestros objetivos específicos: 1) Estudiar la expresión de Gal-8 en líneas celulares humanas de carcinoma mamario; 2) Identificar proteínas que se unen a Gal-8 en líneas de carcinoma mamario humano y 3) Evaluar la expresión de Gal-8 en tejidos humanos mamarios normales y tumorales. Los Resultados demostraron que los extractos totales de células T47D y MCF-7 de carcinoma mamario humano presentaron una banda de Gal-8 (36 kDa) en inmunoblotting revelado con un anticuerpo policlonal anti-Gal-8. Por otra parte, a los efectos de identificar proteínas que ligan Gal-8, la fracción de membranas de las células T47D se sometió a cromatografía de afinidad en AffiGel 10-Gal-8. El eluído se analizó en SDS-PAGE, y las bandas resultantes se digirieron in gel con tripsina y se sometieron a HPLC-espectrometría de masa, identificándose las siguientes proteínas ligandos: CD98h, CD36, CD71, CD82, CD107a/b, CD276 y â-actina. La presencia de ligandos para Gal-8 en la superficie de células T47D fue también confirmada por FACS. En estudios preliminares de inmunohistoquímica, se encontró Gal-8 en cortes histológicos de tejidos mamarios humanos normales y malignos. Se concluye que Gal-8 se expresa tanto en líneas celulares de carcinomas mamarios como en tejidos mamarios humanos, y que varias proteínas se unen en forma específica a esta lectina en carcinomas mamarios, pudiendo alguna de ellas mediar procesos vinculados a la transformación maligna o la metástasis.