Mecanismos bioquímicos de regulación del ciclo celular mediados por GAP-43

DE MOLINER, K.L; WOLFSON, M.L; MILANESIO, B; ADAMO A.M.

Buzios, Brasil

Congreso; I Congreso IBRO/LARC de Neurociencias de América Latina, Caribe y Península Ibérica; 2008

IBRO/LARC

Mecanismos bioquímicos de regulación del ciclo celular mediados por GAP-43 De Moliner, K.L.; Wolfson, M.L.; Melanesio, B. y Adamo A.M. Depto. de Quím. Biol. Fac. de Farmacia y Bioq. IIMHNO-UBA. IQUIFIB -CONICET. GAP-43 es una proteína específica del sistema nervioso y es el principal componente en la vía de señales intracelulares que integra las respuestas de la membrana plasmática y el citoesqueleto a señales extracelulares. En neuronas diferenciadas la respuesta de GAP-43 a esas señales tiene un papel crucial en el crecimiento axonal y su ausencia causa severos defectos en la citoarquitectura del SNC. La expresión de GAP-43 estaba acotada a células post mitóticas, pero resultados recientes demostraron que se induce su expresión en neuroblastos proliferantes y se requiere para la maduración de neuronas. Por otro lado, se demostró que líneas celulares provenientes de gliomas pierden la expresión de GAP-43 y que su reexpresión resultó en la supresión del crecimiento por modulación de señales mitogénicas. Nuestro objetivo fue estudiar la participación de la sobre-expresión de GAP-43 en el control del ciclo celular. Demostramos que la sobre-expresión de GAP-43 en células NIH-3T3 produce un arresto del ciclo celular en la fase G0/G1 concomitantemente con una disminución en los niveles de ciclinas D1 y E y de la actividad de las kinasas asociadas a las mismas, cdk2,4 y 6. También observamos un aumento de p27. Posteriormente estudiamos la participación de la vía de señalización mediada por ERK1/2 en este proceso y los resultados no mostraron una fosforilación diferencial de ERK1/2. Además el tratamiento con el inhibidor PD98059 (inhibidor de las MEK) no muestra reversión de los efectos observados en las células que sobre-expresan GAP-43. La vida media de un ARNm depende de secuencias específicas (ARE) en el transcripto, generalmente localizadas en el 3´UTR  y de las ARN binding proteins que se unen a dichas secuencias promoviendo su estabilización o degradación. Se ha demostrado que una de las ARE-binding protein (HUD) se une a la región 3´UTR de ciclina D1 promoviendo su estabilización. Estamos evaluando en células que sobre-expresan sólo la región 3´UTR de GAP-43 y en aquellas que expresan el ARNm de GAP-43 sin esta región, si el control del ciclo celular se debe a un secuestro de la proteína HUD del ARNm de ciclina D1 desestabilizándolo y favoreciendo su degradación. De esta manera disminuirían los niveles de ciclina D1 con el consecuente arresto del ciclo celular observado.