La hormona de crecimiento desensibiliza selectivamente la activación de STAT3 y STAT5 por el factor de crecimiento epidérmico en hígado.

GONZÁLEZ L, DÍAZ ME, MIQUET JG, SOTELO AI, TURYN D

Capital Federal, Buenos Aires

Congreso; XV Congreso de la Sociedad Argentina de Endocrinología y Metabolismo (SAEM); 2007

Sociedad argentina de endocrinología y metabolismo

OBJETIVO: El factor de crecimiento epidérmico (EGF) es un factor de crecimiento fundamental para el control de la proliferación y supervivencia celular asociado a diversos procesos tumorogénicos, entre ellos al carcinoma hepatocelular. El receptor para EGF (EGFR) puede ser activado no solo por unión directa del ligando específico sino también por transactivación. La hormona de crecimiento (GH) puede activar indirectamente al EGFR como así también regular el recambio y grado de activación del receptor por fosforilación en treoninas. Por otra parte, niveles crónicamente elevados de GH se vinculan con el desarrollo de cáncer. Los ratones transgénicos que sobreexpresan GH son más susceptibles que los animales normales a desarrollar distintos tipos de cáncer. Dado que el EGF y la GH han sido asociados con el desarrollo y progresión tumoral y que numerosas evidencias señalan la existencia de intercomunicación entre estas hormonas, el objetivo de este trabajo es analizar el impacto que altos niveles de GH circulante ejercen sobre la señalización de EGF en hígado. METODOLOGÍA: Para analizar si la GH modula la señal de EGF en hígado se estudió la señalización de este factor de crecimiento en ratones transgénicos que sobreexpresan GH bovina (bGH) bajo el control del promotor del gen de la fosfoenolpiruvatoquinasa. Los animales transgénicos y sus respectivos controles normales recibieron GH, EGF recombinante o solución salina por vía intraperitoneal. Luego, los ratones fueron sacrificados y se les extrajo el hígado para su solubilización. Posteriormente, se midió la concentración de proteínas en los solubilizados por el método de Bradford. Para analizar la activación de proteínas involucradas en la señalización de EGF las moléculas de interés se inmunoprecipitaron con anticuerpos específicos o se determinaron directamente del solubilizado total por Western InmunoBlot usando anticuerpos específicos. La interacción se reveló con un reactivo quimioluminiscente. RESULTADOS: En los ratones transgénicos la expresión de EGFR se encontró significativamente aumentada como así también su nivel de fosforilación basal en tirosinas. Sin embargo, cuando se analizó el grado de activación del EGFR por estímulo agudo con EGF no se observaron diferencias significativas entre los ratones normales y transgénicos. Se analizó posteriormente la activación por estímulo agudo con EGF de Erk1/2 y de Akt, ambas moléculas involucradas en vías de señalización ampliamente vinculadas con proliferación y supervivencia celular y por lo tanto exacervadas en procesos tumorogénicos. No se observaron, tampoco este caso, diferencias significativas en el grado de activación de estas moléculas por EGF entre los ratones normales y transgénicos. Posteriormente, se determinó el grado de activación de Stat5 y Stat3 por EGF. Si bien se observó un incremento de la fosforilación basal de Stat3, pero no de Stat5, en los ratones transgénicos, frente al estímulo agudo con EGF estas moléculas fueron fosforiladas significativamente menos  en los animales que sobreexpresan GH. Esto evidencia una fuerte desensibilización heteróloga de la activación de Stat3 y Stat5 por EGF. CONCLUSIONES: Si bien concentraciones crónicamente elevadas de GH producen un aumento de la expresión y activación basal de proteínas involucradas en la señalización de EGF, esto no redunda en una mayor respuesta frente al estímulo con el mitógeno. Por el contrario, la activación de las MAPKs y Akt por EGF no se ve afectada por las altas concentraciones de GH mientras que la activación de Stat3 y 5 por EGF se encuentra desensibilizada. Es interesante el efecto selectivo de la sobreexpresión de GH sobre la vía de señalización de EGF que involucra a Stat3 y Stat5. Las Stats han sido propuestas como blanco de acción de regímenes terapéuticos antitumorogénicos. El estudio de los mecanismos moleculares responsables de la desensibilización heteróloga selectiva que GH ejerce sobre la señalización de EGF permitirá conocer con mayor detalle la intercomunicación entre EGF y GH como así también la relevancia de las Stats como blanco selectivo de terapias antitumorales.