Efecto de anticuerpos dirigidos contra un péptido sintético consenso incluído en un epitope compartido por receptores de varias citoquinas

BELLOC CG, PEÑA C, MIRANDA, M.E, RETEGUI LA

Mar del Plata, Pcia Buenos Aires

Congreso; LV Congreso de la Sociedad Argentina de Inmunologia.; 2007

SOCIEDAD ARGENTINA D EINMUNOLOGÍA

El anticuerpo monoclonal (MAb) denominado R7B4 reconoce un epitope compartido por receptores pertenecientes a la llamada superfamilia de receptores de citoquinas de tipo I, que incluye las prolactinas, las hormonas de crecimiento (GH) y las interleuquinas (IL) 2, 3, 4, 5, 6, 7, 11, entre otros. Dicho epitope está representado por un péptido consenso (His–Gly–Tyr–Trp–Ser–Glu–Trp–Ser–Pro-Glu) que fue identificado y posteriormente sintetizado.             Con el propósito de obtener Ab policlonales que simularan la acción del MAb se inocularon ratones C57BL/6 con el péptido consenso en presencia de un adyuvante denominado PADRE (por Pan HLA DR-binding Epitope), el cual intensifica la reactividad inmunológica de diferentes haptenos. Sintetizamos el péptido PADRE: a–Lys-X-Val–Ala–Ala–Trp–Thr-Leu–Lys–Ala-Ala-a-Z–Cys, (a indica la  D-alanina, X representa  la ciclohexilalanina y Z es el ácido aminocaproico), que fue luego purificado por HPLC e identificado por espectrometría de masa.       Se halló que varios antisueros obtenidos a partir de ratones inmunizados con el péptido + PADRE (50mg de cada péptido en adyuvante de Freund)  inhibieron significativamente (p<0.001) la unión de la GH de origen humano a receptores presentes en hígado de rata. Los sueros también bloquearon la unión de 125I-IL6 a los receptores de las células 7TD1 (p<0.001). En ningún caso los Ab anti PADRE afectaron la unión de la GH o de la IL6 a las membranas.             Por otro lado, se realizaron experimentos de inmunocitoquímica con la finalidad de estudiar el espectro de expresión del epitope R7B4 en diferentes líneas celulares de origen humano y murino. Se halló que tanto el MAb como los Ab anti péptido consenso reconocen células tumorales y normales. Se concluye que la utilización de PADRE como adyuvante aumentó considerablemente la respuesta anti péptido consenso, y que dichos Ab simulan efectivamente la acción del MAb R7B4, por lo que el péptido consenso podría ser eventualmente utilizado como agente inmunomodulador.