Efecto del receptor purinérgico P2Y1 sobre la actividad proliferativa de las células progenitoras en la regeneración retiniana

BEJARANO CA; BATTISTA A; FAILLACE MP

Mar del Plata

Congreso; LVIII REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL 2013 Sociedad Argentina de Fisiología XLV REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; 2013

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193. (406) EFECTO DEL RECEPTOR PURINÉRGICO P2Y1 SOBRELA ACTIVIDAD PROLIFERATIVA DE LAS CÉLULASPROGENITORAS EN LA REGENERACIÓN RETINIANABejarano C.; Battista A.; Faillace M.Laboratorio de Neurociencia, Departamento de CienciasFisiológicas, Facultad de Medicina, Universidad de BuenosAires e Instituto de Química y Fisicoquímica Biológicas(IQUIFIB)-CONICET.Durante el proceso de regeneración retiniana, una poblaciónde células de Müller reingresa al ciclo celular, entre 24-72h posterioresal daño, para generar células progenitoras neuronales ygliales (CP) que continúan proliferando, migran y se diferencianen los distintos tipos celulares.Se estudió el rol de los nucleótidosextracelulares endógenos (NE) y del receptor purinérgico P2Y1(P2Y1R) en la regulación de la proliferación de las posibles célulasde Müller y de las CP luego de inyecciones intravítreas conouabaína 12 μM (OUA), que provoca muerte celular en todas lascapas de la retina del pez cebra (Danio rerio).Un lote de pecesfue inyectado con: OUA el día 0 (lesionado), solución fisiológica(SF) de 1-3 días postlesión (dpi) y SF+BrdU (20 μg/μl) de 4-7dpi. Otro lote de peces fue inyectado con: SF de 0-3 dpi (controlsalino) y SF+BrdU de 4-7 dpi. Un tercer grupo fue inyectado con:OUA el día 0, MRS2179 (antagonista del P2Y1R) de 1-3dpi yMRS2179+BrdU de 4-7dpi. Otros grupos de peces, se lesionaroncon OUA o SF y se inyectaron con BrdU 5 h previas al sacrificio alos 2 y 6 dpi. Se realizó inmunofluorescencia doble para detectarcélulas positivas para BrdU y el P2Y1R sobre cortes de tejido a 2,6 y 7 dpi. Se detectaron y cuantificaron los niveles de ARNm de losreceptores purinérgicos mediante las técnicas de RT-PCR estándary cuantitativa.Los NE actuarían sobre los P2Y1R ubicados enla membrana de algunas de las CP para inducir su actividad proliferativa.Además, los niveles del ARNm y la proteína del P2Y1Rmostraron un incremento significativo durante la etapa proliferativa.A su vez, se observó un cambio en la distribución espacial delP2Y1R. Por otro lado, existe una disminución significativa de laproliferación en el lote tratado con MRS2179.Se propone que losNE actuando vía el P2Y1R son señales necesarias para inducirla proliferación de posibles células de Müller (2 dpi) así como deCP (6 y 7 dpi) durante el pico de proliferación.