Identificación y caracterización de cepas de Azospirillum sp. según su tolerancia al estrés osmótico

GARCÍA J.; MARONICHE GA; GROPPA M.D.; PERTICARI A

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología; 2013

Asociación Argentina de Microbiología

Las bacterias del género Azospirillum son habitantes del suelo de vida libre que, bajo ciertas condiciones, resultan benéficas para las plantas al promover su crecimiento. Existe en la bibliografía antecedentes en donde está demostrado que la inoculación con Azospirillum mejora el crecimiento bajo condiciones de estrés hídrico. La falta de agua es la condición de estrés que causa las mayores pérdidas a la agricultura. Así como los vegetales sufren del estrés hídrico cuando la disponibilidad de agua es menor a la necesaria, las bacterias padecen de estrés osmótico cuando hay un cambio en la salinidad del medio. El estrés que presentan las bacterias ante los cambios en el medio puede tener aplicaciones prácticas ya que puede ser empleado para seleccionar cepas más eficientes bajo este tipo de condiciones para posteriores ensayos de inoculación de cultivos sometidos a estrés hídrico. Es limitado el conocimiento acerca del comportamiento diferencial de cepas de Azospirillum frente al estrés osmótico, es por ello que este trabajo tuvo como objetivo identificar y caracterizar cinco cepas de Azospirillum (Az39, Az3, Az8, Az19 y Az63) depositadas en la colección BPCV, IMYZA, INTA según su tolerancia al estrés osmótico. En primer lugar, las cepas fueron genotipificadas molecularmente por secuenciación parcial del gen rpoD. Un análisis filogenético con las secuencias obtenidas indicó que todas las cepas pertenecen de la especie A. brasilense. A continuación, se analizó la tolerancia de las cepas al estrés osmótico. Para ello, se inocularon 20 mL de medio líquido conteniendo ácido málico, NH4Cl y sorbitol 2M como agente osmótico, con 1x109 UFC de cada cepa a partir de un precultivo. Se pusieron a crecer en agitador rotativo a 30°C y se realizó recuento de células viables, por duplicado, a las 6, 24 y 48h posinoculación utilizando el método de la microgota en medio RC. El ensayo, incluyendo los precultivos, fue repetido dos veces, y cada momento fue tomado como un bloque. Los datos se analizaron por un análisis de varianza, y el test de Tukey para comparar las medias. Los resultados indicaron que, bajo estrés osmótico, la cepa Az19 presenta mayor crecimiento (p