Interacción de galectina-1 con la gonadotrofina coriónica humana y glicoproteínas de membrana de la línea tumoral de Leydig MA-10

BIRON, VERÓNICA A.; BESIO-MORENO, MARCOS; YOSHIZAKI, LUCILA; TRONCOSO, MARÍA F.; PIGNATARO, OMAR P.; WOLFENSTEIN-TODEL, CARLOTA

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y LIV Reunión de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2006

Sociedad Argentina de de Investigación Clínica

En trabajos previos demostramos la expresión de galectina-1 (Gal-1), proteína con afinidad por b-galactósidos, en la línea tumoral de Leydig MA-10 (cLMA-10), el efecto bifásico de la Gal-1 exógena sobre el crecimiento y muerte celular, la promoción de la adhesión e inhibición de la capacidad esteroidogénica de estas células. El objetivo de este trabajo fue identificar los ligandos de Gal-1 que podrían estar involucrados en los efectos de la lectina observados previamente. Se determinó mediante inmunofluorescencia y citometría de flujo la presencia de sitios de unión para Gal-1 en la membrana de las cLMA-10 (IFM: Control: 2.32±0.43 vs anti-Gal-1: 12.11±0.36, p<0.001). Se aisló la fracción de membrana y las proteínas solubilizadas se sometieron a cromatografía de afinidad en una columna de agarosa-Gal-1, eluyéndose específicamente los ligandos de Gal-1 con lactosa. El análisis de las proteínas eluídas por SDS-PAGE determinó la presencia de ligandos entre 40-120 kDa. Las distintas bandas fueron sometidas a digestión in gel con tripsina e identificadas mediante HPLC-MS. El análisis de los péptidos obtenido, en comparación con bases de datos, sugiere la presencia de las glicoproteínas de membrana CD107b (LAMP-2), CD98 (SLC3A2, antígeno 4F2) y CD147 (EMMPRIN, basigin). Por otro lado, se evaluó la interacción de Gal-1 con la hormona glicoproteica hCG., observándose la formación de complejos insolubles. Como conclusión, se pudieron identificar ligandos de Gal-1 presentes en la membrana plasmática o entorno celular de las cLMA-10 pudiendo las interacciones de la Gal-1 con estos ligandos estar involucradas en el efecto regulatorio de la lectina sobre esta línea celular.