Estudio de retinoides como inhibidores del transporte de poliaminas y aminoácidos en Trypanosoma cruzi

CHANTAL REIGADA; EDWARD A. VALERA VERA; CARLA C. ÁVILA; MELISA MARTINEZ SAYÉ; MARIANA R. MIRANDA; CLAUDIO A. PEREIRA

Santa Fe

Simposio; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2016

Sociedad Argentina de Protozoología

Las poliaminas son metabolitos esenciales para elcrecimiento y diferenciación de las células.Trypanosoma cruzi es auxótrofo para putrescina yestas moléculas deben ser obtenidasexclusivamente del medio extracelular pormecanismos de transporte. Por lo tanto, eltransportador de poliaminas es un interesanteblanco terapéutico contra la enfermedad deChagas. En el presente trabajo se identificó unadroga tripanocida, usando el transportador depoliaminas de T. cruzi (TcPAT12), como blancopara el reposicionamiento de drogas mediante elempleo de técnicas in silico e in vitro. Secomenzó con una búsqueda por similitudpartiendo del acetato de retinol como compuestode referencia, el cual según reportes previosdisminuye los niveles de poliaminas enLeishmania spp. Mediante el rastreo en una basede datos de 3,000 drogas aprobadas por la FDAse obtuvieron siete retinoides usados enmedicina. Con estos compuestos y un modeloestructural del transportador TcPAT12 se realizóun análisis de ?molecular docking?. De lasimulación computacional de interacción entreTcPAT12 y los retinoides como ligandos, seseleccionó para realizar los ensayos in vitro a laisotretinoína, una droga usada para el tratamientode acné. Se demostró que esta droga no soloinhibió el transporte de poliaminas sino también eltransporte de aminoácidos de la misma familia,denominada TcAAAP. Los valores de IC50calculados para putrescina, lisina, prolina y unamezcla de 15 aminoácidos se encontraron en elrango 4,6-10,3 μM. La isotretinoína no produjouna inhibición significativa sobre lostransportadores no relacionados con los de lafamilia TcAAAP. Este retinoide presentó actividadtripanocida en el estadio tripomastigote, con unaIC50 de 130 nM mientras que en epimastigotes laIC50 fue significativamente mayor (30,6 μM).También se estudió si el efecto de la isotretinoínapodría deberse a una desestabilización de lamembrana plasmática del parásito, pero no seobservó ningún cambio en esta estructura.Tampoco la droga afectó la viabilidad de célulasde mamíferos. En conclusión, estos resultadosdemuestran que la isotretinoína puede inhibir eltransporte de metabolitos esenciales y posee unaactividad tripanocida en el rango nM siendo unadroga prometedora para el tratamiento de laenfermedad de Chagas.