Identificación de una droga tripanocida mediante el empleo de estrategias combinadas de ?virtual screening?

CHANTAL REIGADA; EDWARD A. VALERA VERA; CARLA C. ÁVILA; MELISA SAYÉ; MARIANA R. MIRANDA; CLAUDIO A. PEREIRA

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Simposio; XVIII Simposio Internacional Sobre Enfermedades Desatendidas; 2017

Fundación Mundo Sano

Las poliaminas, putrescina, espermidina y espermina sonmetabolitos esenciales para el funcionamiento celular ycrecimiento del parasito Trypanosoma cruzi. En tripanosomatidos,son precursoras en la biosintesis de tripanotion,fundamental para el equilibrio redox. Dado que T.cruzi es incapaz de sintetizar las poliaminas de novo, sudisponibilidad intracelular depende exclusivamente deltransporte. Por lo tanto, el transporte y el metabolismode poliaminas son interesantes blancos terapeuticos contrala enfermedad de Chagas. Con el objetivo de identificardrogas que inhiban el transporte de poliaminas seuso la permeasa de estos compuestos de T. cruzi, denominadaTcPAT12, como blanco para el reposicionamientode drogas mediante el empleo de tecnicas in silico e invitro. En primer lugar se realizo una busqueda por similitudutilizando una base de datos de 3000 drogas aprobadaspor la FDA y el acetato de retinol como compuesto dereferencia. Este compuesto, segun reportes previos, enLeishmania spp. produce la disminucion intracelular depoliaminas. Con las drogas obtenidas en la primera etapay un modelo tridimensional del transportador TcPAT12se realizo un analisis de ?molecular docking?. Finalmente,se realizaron ensayos in vitro con epimastigotes y celulasinfectadas con tripomastigotes de T. cruzi. Con la primeratecnica de ?virtual screening? basado en similitud seobtuvieron siete retinoides, los cuales fueron utilizadospara la segunda tecnica de ?molecular docking?. Finalmentese selecciono la isotretinoina, una droga usadapara el tratamiento de acne, para realizar los ensayos invitro. Se demostro que este retinoide inhibio el transportede poliaminas y aminoacidos; se obtuvieron valoresde IC50 entre 5 ? 10 μM para poliaminas, lisina, prolinay una mezcla de 15 aminoacidos. La isotretinoina mostroun efecto tripanocida fuerte sobre la eclosion de tripomastigotesen celulas infectadas tratadas con esta drogacon una IC50 de 130 nM y un indice de selectividad cercade 920. Se propusieron autofagia y apoptosis comomecanismos de muerte del parasito inducidos por la droga.Estos resultados demuestran que la isotretinoina, uncompuesto aprobado por la FDA, inhibe el transporte demetabolitos esenciales de T. cruzi y resulto ser 25 vecesmas efectiva que las drogas nifurtimox y benznidazol.Por lo tanto, la isotretinoina es una droga prometedorapara el tratamiento de la enfermedad de Chagas.