16S T-RFLP de consorcio bacteriano celulolítico y aislamiento de Paenibacillus sp. como integrante puro con actividad celulolítica

SILVINA GHIO; JUAN SILBERMAN; SOFÍA SAMPAOLESI; ELEONORA CAMPOS

Mar del Plata

Congreso; VIII Encuentro para Latino América y el Caribe de Biotecnología REDBIO; 2013

REDBIO Argentina

16S T-RFLP DE CONSORCIO BACTERIANO CELULOLÍTICO Y AISLAMIENTO DEPAENIBACILLUS SP. COMO INTEGRANTE PURO CON ACTIVIDAD CELULOLÍTICASilvina Ghio1; Juan Silberman1; Sofía Sampaolesi2; Eleonora Campos2; Daniel Grasso11Instituto de Suelos, CIRN, INTA Castelar; 2Instituto de Biotecnología, CICVyA, INTACastelarEl consorcio bacteriano CB1-2 fue enriquecido y aislado de suelo forestal nativo utilizando carboximetilcelulosa (CMC) como fuente de carbono. Dicho consorcio fue cultivado mediante sucesivos repiques en medio líquido con diferentes sustratos celulósicos: CMC, Avicel, papel de filtro, celulosa fluff y eucaliptus pre-tratado. El análisis 16S T-RFLP, utilizando las enzimas CfoI y HaeIII, reveló la presencia de picos de 206, 235 y 241 pares de bases, los cuales pudieron relacionarse con los géneros Pseudomonas y Paenibacillus/Bacillus. Se observó una mayor abundancia relativa del género Pseudomonas en la mayoría de los sustratos, excepto al cultivarse con celulosa, donde se observó una prevalencia de integrantes asociados a los géneros Paenibacillus/Bacillus. Se aisló e identificó Paenibacillus sp. como integrante celulolítico puro del consorcio CB1-2, mediante repiques en medio de cultivo con CMC y azul tripán. La actividad CMCasa y la capacidad hidrolítica (CH) resultaron similares entre el consorcio CB1-2 y Paenibacillus sp., aunque los zimogramas revelaron bandas proteicas diferentes: de 70, 55 y 40 kDa para CB1-2 y de 40 y 55 kDa para Paenibacillus sp. Las bacterias degradadoras de celulosa aisladas en este estudio constituyen una fuente promisoria de enzimas para su utilización en la producción de bioetanol de segunda generación.