Efecto de la TRH sobre cultivos de fibroblastos cardiacos de rata: accion profibrotica y apoptotica

SCHUMAN, MARIANO LUIS; COPA VANESA; LANDA, MARIA SILVINA; ALVAREZ, AZUCENA LAURA; FINKIELMAN, SAMUEL; PIROLA, CARLOS JOSE; GARCIA , SILVIA INES

Mar del Plata - Ciudad de Buenos Aires.

Congreso; LIII Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2008

SAIC

EFECTO DE LA TRH SOBRE CULTIVOS DE FIBROBLASTOS CARDIACOS DE RATA: ACCIÓN PROFIBRÓTICA Y APOPTÓTICA. M L SCHUMAN 1 , V Copa 1 , M S Landa 1 , A Alvarez 1 , S Finkielman 1 , C J Pirola 1 , S I Garcia 1 1CARDIOLOGIA MOLECULAR, INSTITUTO DE INVESTIGACIONES MEDICAS A. LANARI, IDIM-CONICET Resumen : Demostramos que en FC de ratas Wistar macho neonatas, agentes hipertróficos (fenilefrina (Phe) e IP3) aumentan la expresión de TRH y ANP y  la estimulación con TRH aumenta la expresión de BMHC y ANP. Decidimos analizar la participación de la TRH en fenómenos involucrados en la patología cardiaca como la fibrosis y apoptósis. Evaluamos la expresión del gen de colágeno III y la relación de los genes proapoptótico/antiapoptótico (Bax/Bcl2) por RT-PCR en tiempo real. Encontramos que la estimulación de cultivos de FC con TRH aumentó en forma dosis dependiente la expresión de colágeno III (24h, Cont: 0,075 +/- 0,017 vs 1μM:0,125+/-0,017, 10μM:0,160+/-0,017) alcanzando plateau a las 48hs (n=4, p<0,02) sugiriendo su acción profibrótica. Además, provocó un aumento de Bax/bcl2 (48h, Cont: 100% vs 1μM:140%; 10μM:142%) que permaneció hasta las 72hs (n= 6; p< 0,04) indicando un aumento de la actividad apoptótica de estas células. Mas aún, la estimulación con un agente cardiotóxico proapoptótico (Doxorrubicina 100μM) aumento la expresión de TRH en un 80% vs control (n=3, p<0,02). La AII, promotor  de ambos procesos (1-10μM ), no provocó diferencias en la expresión de TRH descartando su participación en esta vía. Datos preliminares muestran un comportamiento diferencial en los FC de hembras dado que existe un aumento en el gen de TRH comparadas con machos en condición basal y no observamos efecto al estimularlas con Phe o IP3 a las 48hs a diferencia de los FC de machos en los que aumenta su expresión. Por el contrario, la AII (1μM) que no produjo cambios en los FC de machos, disminuyo la expresión del gen de TRH a casi un 70% del control (n=6; p<0,04) y no produjo cambios en colágeno III aunque sí se observó un aumento de Bax/Bcl2. Demostramos por primera vez  la participación de la TRH en los procesos fibróticos y/o apoptoticos de los fibroblastos cardiacos de rata Wistar macho. Los resultados plantean la necesidad de continuar los estudios diferenciando FC entre machos y hembras.