Identificación de la interacción de Hemo-oxigenasa 1 con el factor de transcripción ZNF589

SCHUSTER, FEDERICO; PAEZ, ALEJANDRA; ANSELMINO, NICOLAS; VALACCO, PIA; NEMIROVSKY, SERGIO; MARTI, MARCELO; COTIGNOLA, JAVIER; VAZQUEZ, ELBA; GUERON, GERALDINE

Mar del Plata

Congreso; LIX Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2014

Sociedad Argentina de Investigación Clinica

El cáncer de próstata (PCa) es la segunda causa de muerte por cáncer en los hombres a nivel mundial y su etiología es desconocida, dificultando la prevención temprana de esta enfermedad. Es ampliamente aceptado que la inflamación aumenta la tumorigénesis del PCa y que un microambiente inflamatorio crónico es un factor decisivo en su progresión. La hemo-oxigenasa 1 (HO-1) ejerce funciones anti-oxidantes y anti-inflamatorias. Previamente documentamos su expresión nuclear en carcinomas prostáticos humanos primarios. En líneas celulares de PCa, la sobre-expresión de esta proteína, indujo su localización nuclear e inhibió la proliferación, migración e invasión y el crecimiento tumoral in vivo. Ensayos de ChIP demostraron que HO-1 se asocia a promotores de genes relevantes en PCa como PSA. Nuestra hipótesis se basa en que HO-1 en el núcleo podría actuar como un co-regulador de la transcripción favoreciendo un fenotipo menos agresivo. Por lo tanto, es clave encontrar los interactores moleculares de HO-1 que sean capaces de cumplir una funcion reguladora a nivel génico, ya que no posee dominios de unión al ADN. Para abordar este objetivo llevamos a cabo un ensayo de pull-down seguido por analisis por MALDI-TOF/TOF (Ultraflex II), mediante el cual se encontraron, entre otras proteínas candidatas a interactuar, un factor de transcripcion de tipo zinc finger (ZNF589), conocidos por su función como represores de la transcripción. Se aislaron extractos proteicos totales y fracciones nucleares y citoplasmáticas de células PC3 tratadas con hemina, inductor farmacológico específico de HO-1 o con vehículo, y se realizaron ensayos de inmunoprecipitación. Se corroboró la interacción física entre HO-1 y ZNF589 tanto en núcleo como en citoplasma. Estos resultados proveen la primera evidencia de la interacción de HO-1 con un factor de transcripción tipo zinc finger.