La TRH participa del efecto hipertrófico y fibrótico inducido por infusión de Angiotensina II (AII)?

PERES DIAZ, LUDMILA S; SCHUMAN, MARIANO LUIS; LANDA, MARIA SILVINA; TOBLLI, J; PIROLA, CARLOS JOSE; GARCÍA SILVIA INES

CABA

Congreso; XXXV Reunión Anual del Consejo Argentino de Hipertensión Arterial; 2014

Sociedad Argentina de Cardiología

Título: LA TRH PARTICIPA DEL EFECTO HIPERTROFICO Y FIBROTICO INDUCIDO POR INFUSIÓN DE ANGIOTENSINA II (AII). PERES DIAZ LS; SCHUMAN ML; LANDA MS;TOBLLI J; PIROLA CJ; GARCIA SI. Cardiología Molecular, Instituto de Investigaciones Médicas A. Lanari, Fac. de Medicina, UBA; IDIM-CONICET. Resumen : El sistema de la TRH cardiaco participa en el desarrollo de hipertrofia cardiaca (HC) en SHR, y su inhibición la atenúa. Su sobreexpresión induce HC en la rata Wistar. La AII además de vasopresora, es proinflamatoria e induce hipertrofia y fibrosis cardíaca, así hipotetizamos que la  TRH podría mediar los efectos cardíacos de AII. Utilizamos ratones C57 adultos con infusión continua de AII (bomba ip. 2 mg/kg/día) vs. fisiológica (SF) durante 7días. Evaluamos los daños en  un grupo con inhibición previa del sistema de TRH, mediante inyección intracardíaca de siRNA especifico contra el precursor de TRH (siRNA-TRH), vs uno con el sistema de TRH cardiaco intacto (siRNA-Con). Registramos diariamente el peso corporal, la PAS, y el consumo de agua. Al sacrificio, se extrajo el corazón y a partir del RNA total de VI se cuantificó la expresión del mRNA de preTRH, su receptor (r-TRH I), colágeno III, BMHC, BNP y TGF-B por PCR en tiempo real. AII aumentó (p< 0.05)  la PAS en ambos grupos evidenciando su efectividad. Aumentó (p< 0.05) la expresión de TRH sólo en el grupo AII+siRNA-Con, verificándose la inducción de TRH por AII y la efectividad del bloqueo del sistema mediante siRNA-TRH. No hubo cambios en el índice hipertrófico (peso corazón/peso corporal) probablemente debido a la corta duración del experimento. Aún así, a los 7d, la AII aumentó (p<0.05) la expresión de BNP, BMHC, colágeno III y TGF-B solo en el grupo AII+siRNA-Con, y no en el grupo con el sistema de la TRH  bloqueado, el cual presentó una expresión de marcadores de daño cardíaco comparable al grupo control (SF). Repetimos el protocolo extendiendo el tiempo de infusión de AII en 14 días para evidenciar el aumento de hipertrofia a través del índice. Nuevamente AII incrementó (p<0.05) la PAS; y como hipotetizamos, encontramos un aumento del índice hipertrófico sólo en el grupo AII+siRNA-Con, mientras que los animales sometidos a la infusión de AII con siRNA-TRH  mostraron un índice hipertrófico similar al grupo con SF (p<0.05) indicando que el bloqueo de TRH atenúa los efectos de la infusión de AII. Además,   AII aumentó (p<0.05) la expresión de BNP, colágeno III y TGFB  en el grupo AII+siRNA-Con y no en el grupo AII+siRNA-TRH, grupo que presentó una expresión de marcadores de daño comparable a los controles demostrando que hace falta un sistema de la TRH intacto para el efecto hipertrófico y fibrótico de la AII. Siendo el fibroblasto crucial en esta patología, evaluamos la estimulación de AII (1uM, 24 hs) en fibroblastos NIH 3T3 y transfectados con siRNA-TRH o siRNA-Con. La AII aumentó (p< 0.03) la expresión de TRH sólo en el grupo de AII+siRNA-Con, verificándose la efectividad del bloqueo y aumentó la expresión de ambos colágenos III/I  y de TGF-B solo en el grupo que presentó  aumento de TRH mostrando su participación en la inducción de colágenos por vía de la AII. Demostramos por primera vez  tanto "in vivo" como "in vitro" la participación de la TRH en los efectos hipertróficos y fibróticos de la AII. ORADOR: PERES DIAZ, LS.OPTA POR PREMIO MOLEDO A LA INVESTIGACION BASICA