INVESTIGADORES
GARCIA Silvia Ines
congresos y reuniones científicas
Título:
El efecto hipertrófico y fibrotico de la AII involucra al sistema de la TRH en cultivo de fibroblastos: posible participación del receptor AT1.
Autor/es:
PERES DIAZ, LUDMILA S; SCHUMAN, MARIANO LUIS; LANDA, MARIA SILVINA; GARCÍA SILVIA INES
Lugar:
SM de Tucuman
Reunión:
Congreso; XXII Congreso Argentino de Hipertensión Arterial Sociedad Argentina de Hipoertension Arterial; 2015
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Hipertension Arterial
Resumen:
El sistema de la TRH cardiaco participa en el
desarrollo de hipertrofia cardiaca (HC) en SHR, y su inhibición la atenúa. Su
sobreexpresión induce HC en la rata Wistar. La AII además de vasopresora, es
proinflamatoria e induce hipertrofia y fibrosis cardíaca. Demostramos que la
infusión de AII durante 7 y 14 días en el ratón C57 induce la expresión de TRH
cardiaca y más aún evidenciamos que sus efectos hipertróficos y fibróticos
requieren de un sistema de TRH activo. Tratando de dilucidar el tipo celular
involucrado, y siendo el fibroblasto crucial en esta patología, nos preguntamos
si en este tipo celular la AII podría inducir TRH y esta a su vez estimular los
genes profibroticos, como hemos observado ?in vivo? en tejido cardiaco. Así
realizamos la estimulación de AII (1uM, 24 hs) en la línea celular NIH 3T3 (fibroblastos
de ratón, n=7 por grupo) a los que previamente les inhibimos el sistema de TRH,
mediante la transfeccion de un siRNA
especifico contra el precursor de TRH (siRNA-TRH), comparándolos con células con
el sistema de TRH intacto (siRNA-Con). La transfección se realizó 36 hs previo
al estimulo utilizando lipofectamina 2000. A las 24 hs post estímulo con AII,
los cultivos fueron levantados y a partir del RNA total se cuantificó la
expresión del mRNA de preTRH, colágeno III, colágeno I, TGF-B y BNP por PCR en
tiempo real. A favor de nuestra hipótesis, observamos que la AII aumentó (p<
0.03) la expresión de TRH. Este aumento solo se evidenció en el grupo de
AII+siRNA-Con con el sistema de TRH activo confirmando además que la maniobra
del bloqueo fue efectiva. La acción de AII sólo indujo la expresión de colágeno
III, TGF-B y BNP en el grupo que
presentó aumento de TRH demostrando que
en necesario el sistema de TRH en los
efectos de la AII. Decidimos estudiar si la inducción de TRH vía AII
involucraba al receptor AT1 y para evaluarlo bloqueamos el receptor AT1 con un
antagonista específico (losartan 10 uM) durante 3 hs antes del agregado de AII en dosis de 1 y 10 uM durante 24 hs en
medio libre de suero definiendo 6 grupos (n=7): 1=Agua, 2=AII 1uM, 3=AII 10 uM,
4=agua+losartan, 5=AII 1uM+lossartan, 6=AII10uM+losartan. La AII indujo como
esperábamos un aumento de TGF-B (p<0.01), aumento que fue completamente
bloqueado con el agregado de losartan (p< 0.01) evidenciando la efectividad
del tratamiento y la de su bloqueante. Al evaluar la expresión de TRH
observamos un marcado aumento en el grupo estimulado con AII 10 uM que se vió
atenuado significativamente con el agregado previo de losartan.
Nuestros resultados muestran que la AII requiere en
gran parte del sistema de TRH para ejercer su acción fibrotica sugiriendo que
la TRH podría actuar como mediador de
los efectos fibróticos de la AII inducidos a través de su receptor AT
1.