Participación del sistema melanocórtico en la regulación de la expresión de TRH en la rata SHR

LANDA, MARIA SILVINA; SCHUMAN, MARIANO LUIS; GARASSINO MARIA BELEN; GARCÍA SILVIA INES

Buenos Aires

Congreso; XXI Congreso Argentino de Hipertensión Arterial (SAHA); 2014

Sociedad Argentina de Hipertension Arterial

La TRH estaría involucrada en la regulación de la ingesta calórica y el gasto energético junto con sistemas de péptidos orexígenos y anorexígenos modulados por leptina, hormona liberada por adipocitos. Muchos trabajos involucran a los receptores melanocórticos en la respuesta presora de la leptina. Dado que aún no existen evidencias del conector fisiológico entre los efectos cardiovasculares de la leptina con el consecuente aumento de la actividad simpática, postulamos que la hipertensión inducida por leptina estaría mediada por la TRH diencefálica (TRHd) a través de receptores melanocórticos tipo 4 (MC4-R). Así,  evaluamos la participación del sistema melanocórtico en la regulación de la presión arterial (PA) en el modelo de rata SHR que presenta una hiperactivación del sistema de TRH hipotetizando que debería encontrarse aumentado respecto a las ratas WKY. Para ello, sacrificamos ratas SRH y WKY adultas, se extrajo RNA de diencéfalo a partir del cual se obtuvo cDNA para la cuantificación de la expresión de genes mediante PCR en tiempo real utilizando HPRT como control de carga. Como es de esperar, la expresión de TRH fue significativamente mayor en las SHR vs. WKY (0.0356±0.0064 vs 0.0273±0.0040, p<0.05, n=5). De acuerdo con nuestra hipótesis, se observaron niveles mayores de expresión de POMC en las ratas SHR en relación a las WKY (0.0431±0.0108 vs 0.0277±0.0042, p<0.05, n=5). Lo mismo fue observado al evaluar la expresión de MC4-R. Para confirmar la participación de MC4-R en la hipertensión de este modelo, realizamos inyecciones intracerebroventriculares (icv) en ratas SHR y WKY con un antagonista de MC3/4-R (SHU). Se implantó una cánula guía en tercer ventrículo que nos permitió realizar inyecciones en el animal despierto. Se registró el peso corporal, consumo de alimento y presión arterial mediante método plestimográfico (CODA System) en condiciones basales y a las 24 hs de la inyección de SHU (0.6nmol/5ul) o solución fisiológica (5ul) como control. De acuerdo a lo esperado, la icv  con SHU generó un aumento en el consumo de alimento y peso corporal respecto al basal, indicando efectividad del tratamiento; y también disminuyó la presión media, sistólica y diastólica en las ratas SHR (# p<0.05, n=5). Los resultados se expresan como media ± D.E., ANOVA, Test de Fisher.   GRUPOS CONSUMO DE ALIMENTO PAS TRH/HPRT BASAL POSTICV BASAL POST ICV WKY-SF 20.3±2.6 20.5±3.6 137.5±6.2 142.3±4.7 0.053±0.726 WKY-SHU 20.0±2.2 26.4±3.2 # 140.5±6.2 143.5±4.8 0.049±0.725 SHR-SF 22.6±1.8 20.8±2.1 219.1±5.1 227.1±3.8 1.403±0.592 SHR-SHU 21.2±2.1 28.8±2.9 # 219.4±6.2 196.9±4.7 # 0.036±0.649 *     Al evaluar la expresion de genes en diencéfalo mediante PCR en tiempo real observamos, de acuerdo a nuestra hipótesis, que la disminución de la PA en el grupo SHR-SHU se acompañó de una disminución en la expresión de TRH respecto a SHR-SF (* p<0.05, n=5). De esta manera demostramos que la expresión de componentes del sistema melanocórtico se encuentran aumentados en la rata SHR indicando que habría un aumento en la actividad del sistema. Además demostramos que la TRH mediaría la acción hipertensora del sistema melanocórtico ya que el bloqueo de receptores MC4-R disminuye la PA junto con la expresion del tripéptido.