La nistatina como inhibidor del transporte de arginina en Trypanosoma cruzi y su potencial reposicionamiento contra la enfermedad de Chagas

BELEN MACIEL; MELISA SAYÉ; CHANTAL REIGADA; MARCOS RENGIFO; FABIO DIGIROLAMO; MARIANA R. MIRANDA; CLAUDIO A. PEREIRA

CABA

Jornada; XVII Jornadas Científicas IDIM; 2023

La enfermedad de Chagas es causada por el parásito protozoario Trypanosoma cruzi y afecta a más de 6 de millones de personas en América Latina. Los medicamentos usados actualmente son el benznidazol (BZN) y el nifurtimox, pero presentan diversos efectos adversos y son poco efectivos en la etapa crónica, por lo que es necesaria la búsqueda de alternativasterapéuticas. El parásito T. cruzi posee un ciclo de vida complejo, alternando entre el hospedador mamífero y el insecto vector. Gran parte de su metabolismo está basado en la utilización de aminoácidos, no sólo como fuentes de energía y carbono alternativas a la glucosa, sino quetambién los puede transformar en importantes reservorios de energía. Este es el caso de la arginina, que puede ser convertida en fosfoarginina por la reacción reversible arginina+ATPP-arginina+ADP. El transportador TcAAP3 es la única permeasa de arginina caracterizada en T. cruzi, y hemos demostrado que al sobre-expresar TcAAP3 se incrementan los niveles dearginina intracelular, provocando un desbalance energético que compromete la supervivencia delparasito. Además, el transportador de arginina de T. brucei, ortólogo de TcAAP3, es esencial para lasupervivencia del parasito. El reposicionamiento de fármacos es una forma rápida yeconómica de encontrar nuevos medicamentos. Aprovechando compuestos ya aprobados para otras enfermedades, este enfoque ofrece un camino más accesible hacia la identificación de nuevas opciones terapéuticas. La nistatina (NIS) es un antifúngico, que puede inhibir al transportador de arginina CAN1 en la levadura Saccharomyces cerevisiae. En este trabajo seevaluó el potencial de la NIS como inhibidor del transportador TcAAP3 de T. cruzi y su actividadtripanocida en la cepa CL Brener. En los ensayos de transporte de arginina la NIS presentó unaconcentración inhibitoria del 50% (IC50) sobre la actividad de TcAAP3 de 1,2 µM ± 0,1 µM. En cuanto al efecto tripanocida de la NIS a las 24hs, en epimastigotas se obtuvo una IC50 de crecimiento de 0,21 µM ± 0,05 µM, mientras que en tripomastigotas la IC50 de supervivencia fue de 4,9 µM± 0,3 µM. En comparación, las IC50 de BZN fueron de 10,5 µM ± 1,1 µM y 3,6 µM ±0,5 µM para epimastigotas y tripomastigotas, respectivamente, por lo que la NIS presentó una buena actividad tripanocida. Se planea seguir estudiando el efecto de la NIS sobre el transporte de arginina de T. cruzi mediante el análisis del tipo de inhibición, su especificidad y su influencia en el metabolismo de arginina. Además, se examinará cómo la NIS afecta la progresión del ciclo de vida intracelular, mediante el seguimiento de la liberación de tripomastigotas en células infectadas y tratadas con NIS. Por último, se estudiará el efecto combinado con el BZN, para evaluarsi existe sinergismo o no. En conclusión, la NIS es un buen agente tripanocida que puede inhibir el transporte de arginina en T. cruzi, y presenta un gran potencial para ser reposicionada como una alternativa terapéutica contra la enfermedad de Chagas.