Identificación y evaluación de posibles inhibidores del trasportador de arginina TcAAP3 de Trypanosoma cruzi mediante el uso de herramientas bioinformáticas

BELEN MACIEL; MELISA SAYÉ; FACUNDO GALCERAN; CHANTAL REIGADA; MARCOS RENGIFO; FABIO DIGIROLAMO; MARIANA R. MIRANDA; CLAUDIO A. PEREIRA

Congreso; XXXIII Reunión anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

La enfermedad de Chagas afecta alrededor de 7millones de personas en Latinoamérica, y es causada por el parásito Trypanosoma cruzi. El metabolismo de T. cruzi se basa principalmente en el consumo de aminoácidos, tanto como fuente alternativa de carbono como reservorio de energía; este último es el ejemplo de la arginina, la cual puede convertirse en fosfoarginina por la reacción reversible de la enzima arginina quinasa (AK): arginina + ATP P-arginina + ADP. Al sobre-expresar el trasportador de arginina TcAAP3, se incrementan los niveles intracelulares de arginina, y se disminuye la expresión de la AK probablemente para compensar el gran consumo de ATP, lo que sugeriría que la viabilidad celular de T. cruzi puede verse afectada alterando el transporte de arginina. Además, se ha reportado que la permeasa de arginina de T. brucei, ortóloga de TcAAP3, es esencial para la supervivencia de los tripomastigotes sanguíneos. En este trabajo identificamos y evaluamos posibles inhibidores del trasportador TcAAP3 y su potencial actividad tripanocida. Se realizó un screening virtual usando distintas bases de datos, con el fin de encontrar compuestos similares a la L-arginina. De más de 320.000 compuestos analizados con distintos algoritmos se obtuvieron 45, los cuales fueron sometidos a docking molecular empleando un modelo 3D dela permeasa TcAAP3 generado por homología. De allí se seleccionaron 5 compuestos para evaluar la capacidad de inhibir al transportadorTcAAP3, y en simultáneo realizar curvas decrecimiento para estudiar la posible acción tripanocida. Sólo la isotretinoína inhibió el transporte de arginina (IC50=2.6µM) y además presentó acción tripanocida con una IC50=25µM mientras que el iobenguano sólo presentó actividad tripanocida con una IC50=182 µM. Como los restantes 3 compuestos no presentaron efecto, se seleccionarán nuevos compuestos a partir del screening virtual, y además se evaluará la posible inhibición de la AK con los compuestos ya seleccionados.