Generación de esferas de alginato como inóculo fúngico para la producción de hongos comestibles.

BRONZATTI A; COLAVOLPE B; ORTIZ G; ALBERTÓ E

Buenos Aires

Jornada; II Jornadas Argentinas sobre Biología y Cultivo de Hongos Comestibles y Medicinales. V Taller Regional de Productores de Hongos Comestibles; 2015

Uno de los principales problemas en la producción de hongos comestibles es la contaminación de sustratos con otros microorganismos. Muchas veces, estas contaminaciones están dadas porque el inóculo de siembra, generado a partir de semillas que provienen del campo, no está en condiciones de esterilidad óptima. El objetivo de este trabajo fue encapsular micelio en esferas de alginato con el fin de reemplazar las semillas en la producción de los hongos comestibles. Para ello se emplearon las cepas ICFC 153/99 de Pleurotus ostreatus, 748/12 de Gymnopilus pampeanus, 293/00 de Lentinula edodes y 745/11 de Agaricus bisporus. Todas ellas conservadas en la Colección de Cultivos Fúngicos del IIB-INTECH (ICFC). Se preparó medio líquido con extracto de levadura para el cultivo de micelio. El micelio fúngico se trasladó a Erlenmeyer que contenían 100 ml de alginato de sodio; con un ?mixer? se desagregó generando una suspensión homogénea. Luego, utilizando una micropipeta se transfirió la suspensión, usando ?tips? con la punta cortada, a un vaso de precipitados (200 ml) con cloruro de calcio, generando un goteo. De esta forma se produjo el encapsulamiento del micelio en pequeñas esferas. Posteriormente, se filtraron y se rescataron las esferas que se dejaron secar en flujo laminar sobre papel filtro. Pequeñas bolsas con 100g de sustrato húmedo (70%) fueron inoculadas con semillas según la metodología tradicional, y otras bolsas fueron inoculadas con las esferas. Los experimentos se realizaron por triplicado. Para P. ostreatus y A. bisporus se utilizó como sustrato paja de trigo, para G. pampeanus y L. edodes fue utilizado aserrín de álamo. Las bolsas fueron dejadas en cuarto de incubación en oscuridad a 25°C durante 7 días, a excepción de G. pampeanus, cuyos resultados no se observaron en ese lapso, por lo que las bolsas se mantuvieron 1 mes más. El porcentaje de inoculación, tanto de semillas como de esferas, fue diferencial según la especie. Para P. ostreatus y G. pampeanus se utilizó 5%, mientras que para L. edodes y A. bisporus, se utilizó respectivamente: 7% y 0.4%. La evaluación de crecimiento de micelio se realizó de acuerdo a la zona colonizada en la superficie de la bolsa, que se dividió en 8 cuadrantes, el porcentaje de micelio obtenido en cada cuadrante se contabilizó y así se obtuvo el % de colonización total. En el caso de P. ostreatus, no se encontraron diferencias significativas en el % de colonización entre bolsas inoculadas con semillas y esferas siendo 87.5% y 73.4% los valores de cobertura obtenidos respectivamente. En el caso de G. pampeanus tampoco hubo diferencias significativas, obteniéndose 35 y 27.5% respectivamente. En el caso de L. edodes y A. bisporus se encontraron diferencias y los valores de mayor cobertura fueron para el tratamiento con inóculo convencional (semilla). En el caso de L. edodes se obtuvo 45% para ?semilla? y 18.5% para ?esferas?; mientras que para A. bisporus se obtuvo 69.5% para ?semilla? y 41.25% para ?esferas?. Mediante este ensayo, pudimos determinar que éste método resulta favorable para la producción de hongos, ya que no hemos encontrado contaminaciones en bolsas, manteniéndose en todo momento la esterilidad en la generación de las esferas. Además, hemos notado que en algunas especies la cobertura total de micelio fue considerable y no se encontraron diferencias significativas entre tratamientos.