Expresión génica de marcadores de resistencia en pacientes con Leucemia Mieloide Crónica (LMC)

GONZALEZ M; DE BRASI CD; BIANCHINI M; FERRI C; LARRIPA I

Mar del Plata

Congreso; XX Congreso de la Sociedad Argentina de Hematología (SAH); 2011

Sociedad Argentina de Hematología (SAH)

La LMC es un desorden mieloproliferativo crónico caracterizado por la formación de un gen hibrido BCR-ABL responsable de su patogénesis. Una fracción de pacientes desarrollan resistencia a la terapia con inhibidores de tirosina kinasa (ITK), siendo la principal causa las mutaciones puntuales en el dominio kinasa del gen ABL. En este trabajo se estudió el perfil de expresión de los genes: CaMKIID, Ki67, HSP70, HSP90 y BCR-ABL involucrados en procesos de diferenciación, proliferación y supervivencia en pacientes con LMC resistentes a ITK para  definir su relación con la presencia (MT) o ausencia (WT) de mutaciones asociadas a la falta de respuesta a los ITK. Se estudiaron 50 paciente resistentes, 27 presentaron las siguientes mutaciones: 4 T315I, 5 E255K/V, 1 G250E, 2 F317L, 3 M351T, 2 F359V/C, 2 L387M, 1 E279K, 1 Y253H, 1 L248V, 1 L348M, 1 E355G, 1 V289F, 1 L389V y 1 N358S mientras que los 23 casos restantes no presentaron mutación. El análisis de la expresión génica y el control de expresión endógeno β2-microglobulina se realizó mediante PCR en tiempo real empleando SyBR Green y oligonucleótidos diseñados para este estudio. La detección de mutaciones se realizó mediante secuenciación directa (ABI-Prism 377).La expresión de CaMKIID, HSP70 y HSP90 resultó mayor para los dos primeros, y menor para el tercero entre los grupos MT y WT, mientras que Ki67 y BCR-ABL no presentaron diferencias. Estos resultados permitieron diseñar un score con los Log10 de las expresiones génicas según [CaMKII más HSP70 menos HSP90]. Con los valores del score se realizaron curvas ROC para maximizar la diferenciación entre las poblaciones MT y WT, y establecer un punto de corte (score límite: -0.79). Valores de score mayores a -0.79 tienen 4.8 (IC95%: 1.3-17.6) veces más probabilidades de presentar mutaciones que valores menores (P<0.02). En conclusión la expresión de los genes CaMKIID, HSP70 y HSP90 permitió elaborar un score  con una especificidad del 82% para la predicción de mutaciones asociadas a la falta de respuesta a los ITK en pacientes con LMC.