Incorporación de alginato a un hidrogel de poliHEMA-EGDMA mejora su capacidad osteoinductora y su potencial de aplicación en Ingeniería de Tejido Óseo

TORRES ML; OBERTI TG; FERNANDEZ JM

Buenos Aires

Congreso; XXXVI Reunión Anual AAOMM; 2019

Ingeniería de Tejido Óseo es una ciencia interdisciplinaria, que toma conceptos de ciencias como Ingeniería de Materiales, Medicina, Bioquímica, Farmacia y Química, entre otros para crear matrices o scaffolds que, una vez implantados en el sitio dañado, sirvan para regenerar el hueso. En este trabajo, mostramos el efecto que produce la incorporación de alginato de sodio (NAlg, Aldrich) en una red polimérica formada por poli 2-hidroxietilmetacrilato (HEMA, Aldrich) entrecruzado con etilenglicol dimetilacrilato (EGDMA, Aldrich) en la capacidad osteogénica de células progenitoras de medula ósea. El HEMA se agregó por goteo a la solución acuosa de NAlg (Alg-poliHEMA/EGDMA) o agua, para el caso sin alginato (poliHEMA/EGDMA) con agitación en una relación 1:1. Una vez obtenida una solución homogénea, se agregó el EDGMA y el AIBN (iniciador de polimerización), hasta disolución total. La solución obtenida se inyectaron dentro del sistema de reacción, el cual está compuesto por dos vidrios y un marco de teflón de 1 mm de espesor. La reacción se llevo a cabo a 60°C durante una hora en estufa. Transcurrido este tiempo, el material fue separado del sistema de reacción y lavado con agua destilada a reflujo durante dos días y secado hasta peso constante. Células Progenitoras de Medula Ósea (CPMO) se obtuvieron a partir de lavados del canal diafisario medular de fémures de ratas machos jóvenes de la cepa WKAH/Hok, mantenidas en medio DMEM con 10% suero fetal bovino (SFB) a 37 ºC en atmosfera humidificada con 5% CO2 y 95% aire. Una vez obtenidos los scaffolds, sobre ellos de sembraron las CPMO en medio osteogénico (DMEM con10% SFB suplementado con beta glicerol fosfato y acido ascórbico) y luego de 14 días se evaluaron marcadores de diferenciación osteoblasticos: actividad de fosfatasa alcalina (mediante la desfosforilacion de sustrato p-nitrofenilfosfato) normalizados frente a proteínas totales y la expresión de los genes de la enzima Fosfatasa Alcalina (FAL), de la proteína Colágeno tipo 1 (COLt1) y el factor de transcripción RUNX-2, mediante PCR, todos normalizados frente a beta actina. La incorporación de alginato a la red 3D poliHEMA/EGDMA no produjo cambios en la actividad de la enzima FAL ni en la expresión de su gen, sin embargo, si produjo un aumento (*: p