Evaluación de la actividad biológica de los fitoesteroles de la Tipa (Tipuanatipu (Benth.) Lillo) sobre células progenitoras de médula ósea

COSTA ML; AMEN Y; MARZOUK AM,; ZAGHLOUL MG; AFIFI MS; MOLINUEVO MS; JUAN MANUEL FERNANDEZ

Congreso; XXXIV Reunión Anual Asociación Argentina de Osteología y Metabolismo Mineral (AAOMM); 2017

El proceso de remodelado óseo dentro de la unidad básica multicelular involucra el acoplamiento entre la formación y la resorción ósea, donde se ha demostrado que los estrógenos juegan un rol importante. Entre las causas de la menopausia se encuentran la disminución en los niveles circulantes de estrógenos y el incremento en el estrés oxidativo, lo cual produce un deterioro en la calidad ósea. La tipa (Tipuana tipu (Benth.) Lillo, Leguminosae (Fabaceae)) es un árbol indígena de nuestro país. Recientemente se han aislado los principales componentes a partir de los extractos metanólicos de la hoja y corteza de la tipa; entre ellos se encuentra el b-sitosterol en su forma libre o como glucósido. Previamente, se ha demostrado que el b-sitosterol posee capacidad de interaccionar con el receptor de estrógenos disminuyendo el estrés oxidativo. Actualmente se lo comercializa en forma de cápsulas para el tratamiento de algunas prostatitis. El objetivo de este trabajo es estudiar el efecto del b-sitosterol aislado de T. tipu sobre la proliferación y diferenciación osteoblástica de las células progenitoras de medula ósea (CPMO). Las CPMO se obtuvieron a partir de lavados del canal diafisario medular de fémures de ratas machos jóvenes de la cepa WKAH/Hok. Las células fueron cultivadas en platos de cultivo, e incubadas 24h en DMEM sin rojo de fenol con concentraciones crecientes de β-sitoesterol (0 ? 10 uM) para evaluar la proliferación (cristal violeta); o 10 días con un medio de diferenciación osteogénico conteniendo b-glicerol fosfato y ácido ascórbico con o sin el agregado de b-sitosterol. La diferenciación osteogénica se determinó evaluando la producción de colágeno tipo 1 (Col1, método de Sirius red) y la actividad de fosfatasa alcalina (FAL, producción de p-nitrofenol a pH 10). Alternativamente, se emplearon células MDA-MB-231 (las cuales carecen de receptores de estrógeno (RE)) para evaluar el rol de los RE sobre las acciones biológicas del b-sitosterol. Los resultados se expresan como la media ± SEM; las diferencias entre grupos fueron analizadas por el test de ANOVA (one-way). Encontramos un incremento en la proliferación celular dependiente de la concentración de b-sitosterol en las CPMO (p