Optimización de la extracción de colágeno a partir de piel de gatuzo (Mustelus schmitti)

VICTORIA ALCOLEA; DANIELA LAMAS; AGUEDA MASSA

Mar del Plata

Congreso; VIII Congreso Internacional de Ciencia y Tecnología de los Alimentos (CICyTAC) 2022; 2024

UTN Mar del Plata

IntroducciónEl colágeno es una proteína fibrosa estructural de la matriz extracelular de los tejidos conectivos e intersticiales. En la actualidad hay una elevada demanda de colágeno, debido a las numerosas aplicaciones que presenta. Sin embargo, dadas las limitaciones de fuentes convencionales, se ha desencadenado la búsqueda de nuevas alternativas. Entre las potenciales opciones se encuentran los residuos generados por la industria pesquera que contienen biocompuestos de interés, entre ellos el colágeno. El uso de colágeno a partir de esta fuente alternativa podría reducir problemas medioambientales y añadir valor a residuos comúnmente desechados.En este contexto, el objetivo de este trabajo fue optimizar y comparar la extracción de colágeno a partir de pieles de gatuzo (Mustelus schmitti) aplicando métodos químicos y enzimáticos, a fin de brindar una alternativa innovadora para el aprovechamiento integral y la valorización de este residuo pesquero.Materiales y MétodosLas pieles de gatuzo fueron reducidas en tamaño, y sumergidas en NaOH 0,1M 1:10 (w/v) a 4°C con agitación constante 2 hs, a fin de eliminar proteínas no colágenas. Posteriormente, se realizóel desgrasado mediante el agregado de etanol a 4 °C 8 hs. Para la extracción ácida, las muestras pretratadas se sumergieron en ácido acético 0,5 M 1:10 (w/v) a 4°C con agitación constante, variando eltiempo de contacto de 24 a 72 hs. En la extracción enzimática, se adicionaron a la solución de ácidoacético distintas proporciones de pepsina comercial (1-5-10%) evaluándose simultáneamente distintos tiempos (24-48-72hs). A continuación, las muestras fueron centrifugadas, el sobrenadante obtenido fue almacenado y el precipitado se resuspendió en la solución de extracción correspondiente (24 hs).Finalmente, los extractos obtenidos fueron centrifugados y se almacenó el sobrenadante.Partes iguales de los sobrenadantes se mezclaron, se purificaron mediante precipitación con NaCl 2,6M en buffer Tris-HCl 0,05M pH 7,5 y se centrifugaron. El precipitado obtenido fue resuspendido en ácido acético 0,5 M. Finalmente, la solución fue dializada en ácido acético 0,1M durante 24 hs, seguido de 24hs en agua. Los productos obtenidos fueron liofilizados y se calculó el rendimiento por gravimetría. A su vez, se caracterizaron mediante la determinación de su absorbancia entre 40 y 190 nm del espectro UV visible y su perfil proteico con SDS-PAGE.ResultadosTodos los extractos mostraron el pico de absorción característico de colágeno deaproximadamente 210 nm. Además, el SDS-PAGE mostró bandas de peso molecularasociado a cadenas alfa de colágenos. Los valores de rendimiento obtenidos con ambos métodos de extracción indican que el tiempo no es una variable significativa en el proceso. Con el método de extracción ácida, el rendimiento obtenido fue entre 12 y 16%. El rendimiento óptimo (354 mg/gr de piel) aplicando la extracción enzimática se obtuvo a 24 hs y una concentración de enzima del 6%.ConclusiónLos resultados obtenidos sugieren que los métodos de extracción químicos yenzimáticos son viables para la obtención de colágeno a partir de pieles de gatuzo brindando así una alternativa biotecnológica innovadora para fomentar el aprovechamiento integral y sostenible de estos recursos.