Evaluación de las propiedades probióticas de levaduras aisladas de lactosuero.

DIAZ VERGARA L; PEREYRA C; MONTENEGRO M; AMINAHUEL C; ALONSO V; PENA G; CAVAGLIERI L

Buenos Aires

Congreso; Congreso Argentino de Ciencia y Tecnología de Alimentos.; 2015

Los probióticos son microorganismos vivos que administrados en cantidades adecuadas generan un efecto positivo sobre la salud del huésped, estos microorganismos deben cumplir con ciertas características para poder ser considerados como probióticos; deben estar clasificados como GRAS (generalmente reconocidos como seguros, por sus siglas en inglés), deben ser capaces de sobrevivir al paso por el tracto gastrointestinal, colonizar el intestino y tener actividad antagónica contra bacterias patógenas. El lactosuero es el principal subproducto de la industria láctea. Su descarte genera importantes problemas de contaminación ambiental, ya que presenta un índice de demanda biológica y química de oxígeno muy elevado. Si bien su composición es variable retiene hasta un 55% de los nutrientes de la leche como la lactosa, proteínas solubles, lípidos y sales minerales, haciendo al lactosuero una fuente de microorganismo y potencial sustrato de bajo costo para la producción de biomasa celular. El objetivo del presente trabajo fue aislar, identificar y caracterizar levaduras con propiedades probióticas provenientes de lactosuero. De 11 muestras de lactosuero de diferentes orígenes se realizaron enriquecimientos con cloranfenicol durante 18 h, luego en buffer fosfato salino (PBS, pH 7,4) se llevaron a cabo diluciones que fueron sembradas en placas con medio conteniendo lactosa como única fuente de carbono y rojo de fenol como indicador de los microorganismos que la utilizan. Se seleccionaron las levaduras fermentadoras de lactosa y se aislaron en agar YPD (extracto de levadura, peptona y glucosa). La identificación se realizó mediante técnicas moleculares utilizando una cepa de referencia de Kluyveromyces sp. La caracterización de las propiedades probióticas se realizó mediante la evaluación de la capacidad de autoagregación, coagregación, producción de sustancias antimicrobianas y supervivencia a través del tracto digestivo. La autoagregación se determinó midiendo la disminución de absorbancia (λ=600nm) luego de dos horas de incubación a 37ºC partiendo de un inóculo con absorbancia 1. La coagregación se evaluó en el microscopio observando la unión de bacterias patógenas a las levaduras luego de 4 h de incubación a 37ºC. La producción de sustancias antimicrobianas se observó enfrentando cepas de levaduras crecidas agar YPD contra bacterias patógenas que fueron inoculadas en una segunda capa de medio de cultivo sobre las levaduras ya crecidas, la actividad antimicrobiana se evidenció por la presencia de un halo de inhibición del crecimiento bacteriano alrededor del inóculo de levadura. La supervivencia al tránsito por el tracto digestivo se evaluó midiendo el número de células viables por mililitro a cada hora durante tres horas simulando el pH gástrico, luego se centrifugó el medio, se descartó el sobrenadante y se utilizó el pellet para inocular un caldo YPD con 0,5% bilis de buey a pH 8 y midiendo las células viables por hora durante tres horas. Se aislaron 16 cepas de levaduras a partir de lactosuero, solo 8 fermentan lactosa, las cuales tienen propiedades probióticas relevantes para su uso en alimentación animal.