PARED CELULAR DE Kluyveromyces marxianus VM004 COMO ADSORBENTE DE AFLATOXINA B1.

PEREYRA C.M.; BONGIOVANNI S; MONGE M.P.; CRISTOFOLINI A; CAVAGLIERI L.R.

Posadas

Simposio; 6º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos; 2021

Universidad Nacional de Misiones

Kluyveromyces marxianus se utiliza en varias aplicaciones biotecnológicas, sin embargo, ningún estudio ha demostrado la influencia del medio de cultivo en la composición de la pared celular (PC) y su relación con la adsorción de micotoxinas. El objetivo de este estudio fue determinar la influencia de las condiciones de cultivo de Kluyveromyces marxianus VM004 sobre el espesor y la composición de la PC y su influencia en la adsorción de aflatoxina B1 (AFB1). La cepa fue inoculada en dos medios de cultivo, caldo extracto de levadura-peptona-dextrosa (YPD) y caldo extracto de granos de destilería secos con solubles (DDG) para la obtención de biomasa y PC. El test de adsorción de AFB1 (150 ng/mL) se realizó usando una concentración de células de 1 x 107 cél/mL y 0,001 g de PC simulando pH gástrico y pH intestinal. La determinación del espesor de la PC y su composición se realizaron usando microscopía electrónica de transmisión (TEM) y espectroscopia infrarroja (IR), respectivamente. La producción de biomasa fue similar en ambos medios de cultivos, para YPD (4,98 g/L) y para DDG (4,24 g/L). El porcentaje de PC obtenido en DDG (33,3%) fue superior al de YPD (8,6%). El diámetro de las células y el espesor de la PC aumentaron en 61,84% y 30%, respectivamente, utilizando caldo DDG. Los espectros IR de la PC provenientes de los dos medios de cultivo estudiados incluyeron tres (3) regiones: polisacáridos (950-1185 cm-1), proteínas (1480-1700 cm-1) y lípidos (2840-3000 cm-1). El análisis indicó la presencia de los grupos C-O, O-H y N-H, los cuales están relacionados con los componentes principalmente quitina y β glucanos involucrados en la adsorción de AFB1. La proporción de β-glucano y quitina fue mayor en la PC obtenida del medio YPD que del medio DDG. El porcentaje de adsorción fue influenciado por el pH ensayado. A pH 2, la adsorción fue mayor que a pH 8 en los dos medios de cultivo estudiados usando las células enteras y la PC. El porcentaje de adsorción (media ± DS) usando la célula entera a pH 2 cultivadas en caldo YPD fue de 8,40 ± 1,11% y a pH 8 el porcentaje disminuyó hasta 1,63%. Las células cultivadas en DDG adsorbieron 13,8 ± 2,3% a pH 2, mientras que a pH 8 la adsorción fue de 5,2 ± 1,8%. La PC extraída de YPD adsorbió 45,3% de AFB1 a pH 2, mientras que a pH 8 fue 29,6%. La adsorción de la PC de DDG a pH 2 fue del 37,7% y del 6,5% a pH 8. En conclusión, la composición del medio de cultivo influyó en la composición de carbohidratos (β-D-glucano y quitina) y, en consecuencia, en la adsorción de AFB1. Este es el primer estudio que reporta la capacidad de adsorción de AFB1 por PC obtenida de una cepa probiótica de K. marxianus VM004. Además, el uso de DDG como fuente de carbono podría reemplazar un medio sintético como YPD para la producción de biomasa y PC destinada a un adsorbente de AFB1.