Rol regulatorio de p21 sobre la replicación de ADN dañado

MANSILLA S, SORIA G, SPERONI J, FEDERICO MB Y V. GOTTIFREDI

mar del Plata

Congreso; LV Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).

Las lesiones producidas durante la duplicación del ADN pueden producir bloqueos irreversibles en la horquilla de replicación y muerte celular. Para garantizar la continuidad de la replicación el proceso conocido como síntesis a través de lesiones (TLS-translesion DNA synthesis) promueve un intercambio de polimerasas replicativas por polimerasas permisivas. Dichas polimerasas pueden acomodar bases dañadas y usarlas como molde, garantizando así la continuidad de la replicación aunque con la potencialidad de aumentar la mutagénesis. Se han identificado diversas polimerasas con especificidades distintas para cada tipo de lesión (por ej:, pol η, especifica para dímeros de timidina), pero poco se sabe de su regulación. Nuestro grupo identificó a p21 como un regulador negativo del cargado de polη sobre ADN lesionado. Para establecer si p21 actúa como regulador negativo de TLS determinamos si su efecto se extendía a todas las polimerasas de TLS. La consecuencias biológicas (acumulación de mutaciones y sobrevida celular) podrían ser muy distintas si p21 afecta específicamente a polη o a todas las pol permisivas en manera global. Un segundo objetivo fue determinar la función de p21 sobre las horquillas de replicación, analizando moléculas únicas de ADN a través del ensayo de fibra o (DNA Combing), en donde pudimos observar el avance de las horquillas en presencia y ausencia de esta proteína y en ausencia y presencia de daño.