Expresión de Transglutaminasa 2 en células epiteliales de intestino humano

BAYARDO M; ALLEGRETTI Y; RUMBO M; CHIRDO FG

Mar del Plata

Congreso; LI Reunión Annual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2006

Sociedad Argentina de Inmunología

La enzima Transglutaminasa 2 (TG2) participa en diversos procesos biológicos tales como reparación del daño tisular, señalización, diferenciación y apoptosis. Se ha descripto que varios estímulos proinflamatorios y algunas citoquinas modulan la expresión de TG2, entre ellas gIFN, TGFb y TNFa son fuertes inductores de TG2. La información disponible en bibliografía muestra una elevada variabilidad en los efectos observados, dependiendo en gran medida del linaje celular estudiado. TG2 es fuertemente inducida en intestino delgado en la lesión de la mucosa intestinal observada en pacientes celíacos activos y está involucrada en el mecanismo de daño. Sin embargo, los inductores de TG2 en la mucosa intestinal aún no han sido caracterizados. Se estudió la expresión de TG2 en células de línea de epitelio intestinal humano (Caco-2 y HT-29). Estas células, comúnmente usadas como modelo de enterocitos, fueron incubadas con TNFa, gIFN, TGFb, IL-1b, IL-6, IL-10 e IL-15 por distintos tiempos. El RNA total fue extraído y analizado el nivel mRNA de TG2 mediante PCR cuantitativa, amplificando un fragmento de 414pb con primers diseñados sobre la secuencia descripta por nuestro laboratorio (Genbank AY675221). En ambas líneas celulares, la incubación por 24 h con gIFN produjo un incremento de 3 a 4 veces en los niveles de TG2. No se observaron incrementos significativos mediados por las otras citoquinas. En el análisis por westernblot, usando anticuerpos monoclonales específicos producidos en nuestro laboratorio, se observó una banda correspondiente a la proteína nativa sin degradación, aunque no se evidenciaron cambios relevantes a nivel de la concentración de TG2 para los distintos tratamientos.  En conclusión, del panel de estímulos analizados, encontramos que la expresión de TG2 fue incrementada en células Caco-2 y HT-29 estimuladas con gIFN, siendo éste probablemente el principal inductor de TG2 en la mucosa intestinal en la lesión celíaca activa donde dicha citoquina es abundante.