Participación de cadherina epitelial en la fecundación en el modelo de ratón.

VEIGA, M.F.; CHOREN, M.V.; CAMEO, M.; VAZQUEZ-LEVIN, M.H.

Instituto de Biología y Medicina Experimental. Buenos Aires

Congreso; X Jornadas de la Sociedad Argentina de Biología; 2008

Sociedad Argentina de Biología

Introducción: La fecundación involucra la adhesión de las gametas. La cadherina epitelial (cadE) es una glicoproteína de transmembrana que participa en la adhesión celular dependiente de Ca2+. Estudios previos de nuestro grupo caracterizaron su expresión en gametas humanas y su participación en la fecundación, así como su presencia en gametas murinas. Objetivos: Evaluar la participación de cadE en la fecundación en el ratón. Metodología: Se realizaron ensayos de fecundación in vitro, de unión de espermatozoides a la zona pellucida (ZP) y de fusión a la membrana plasmática (MP) del ovocito en presencia/ausencia de anticuerpos anti cadE (H-108: dominio cadherina 5; ECCD1: dominio cadherina 1). Resultados: La preincubación de los espermatozoides con H-108 (20 mg/ml) resultó en la inhibición (p<0,05) de la fecundación in vitro de ovocitos con células del cumulus (% inhibición= 38) o denudados (% inhibición= 54) y de la unión de los espermatozoide a la ZP (% inhibición= 32). El anticuerpo ECCD1 inhibió (p<0,0001) la fusión de espermatozoides a la MP del ovocito (% inhibición= 64). Discusión: Los resultados sugieren la participación de cadE en eventos de interacción espermatozoide-ovocito que conducen al éxito de la fecundación en el ratón. (Version en Inglés, como será publicado en Biocell) Introduction: Mammalian fertilization involves gamete adhesion events. Epithelial cadherin (Ecad) is a transmembrane glycoprotein that participates in Ca2+ dependent cell-cell adhesion events.  We have characterized the expression of Ecad in human spermatozoa and oocytes, and shown evidence of its involvement in fertilization. Its localization in murine gametes was later described by us. Objetive: To evaluate the participation of Ecad in murine fertilization. Methods: In vitro fertilization  (IVF), as well as binding to zona pellucida (ZP) and fusion to the oolemma assays were done in the presence/absence of anti Ecad antibodies (H-108: cadherin 5 domain; ECCD1: cadherin 1 domain). Results: Sperm preincubation with H-108 (20 mg/ml) resulted in inhibition (p<0.05) of fertilization on IVF assays done with cumulus oocyte complexes (38 % Inhibition Rate, IR)  or denuded oocyte (54% IR). Moreover, sperm preincubation with H-108 antibody impaired sperm binding to ZP (32% IR). The ECCD1 antibody inhibited (p<0.0001) sperm fusion to the oolema (64% IR). Discussion: The findings from this report are in agreement with previous studies in humans and support the notion of Ecad participation in gamete adhesion events leading to fertilization.