Efecto de especies reactivas del oxígeno sobre cultivos organotípicos de neoestriado.

KRUSE , MS; J BARUTTA , VR BOTI , E SARACENO , F CAPANI , H COIRINI

Mar del Plata

Congreso; 52 Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2007

SAIC

En trabajos previos hemos demostrado efectos bioquímicos y morfológicos debidos a la producción de radicales libres por un fenómeno hipóxico-isquémico en un modelo animal. Con el fin de estudiar en detalle los procesos moleculares provocados por este evento comenzamos a caracterizar cultivos organotípicos de núcleo estriado utilizando cortes coronales de cerebro (500um) de ratas Sprague-Dawley de 7 días de edad que fueron cultivados sobre membranas Millicell durante 7, 14 y 21 días las cuales fueron incubadas al final de estos períodos en presencia de H2O2  0,1; 0,3 y 10mM durante 3hs. El grado de vulnerabilidad celular fue monitoreado mediante la prueba de exclusión con azul de trypan evaluándose además la expresión de GFAP y calbildina por inmunocitoquimica.  Los cortes de tejido redujeron su espesor con el tiempo de cultivo y  mantuvieron sus características durante las tres semanas. Los tratamientos con H2O2 provocaron una muerte celular dependiente de la dosis. Cambios en la inmuno marcación con GFAP y calbildina fueron acordes con el grado de injuria producida por las dosis crecientes de H2O2. Cultivos organotípicos de estriado pueden ser utilizados para evaluar cambios bioquímicos estructurales en fenómenos hipóxico-isquémico in vitro.