LA ANGIOTENSINA-(1-7) ESTIMULA LA TRANSLOCACIÓN DEL RECEPTOR MAS AL NÚCLEO CELULAR EN NEURONAS DE RATAS ESPONTÁNEAMENTE HIPERTENSAS

FLAVIA MICAELA CERNIELLO; NADIA LONGO CARBAJOSA; MARIA ANGELES COSTA; MARIELA GIRONACCI

Congreso; XXI CONGRESO ARGENTINO DE HIPERTENSIÓN ARTERIAL; 2014

LA ANGIOTENSINA-(1-7) ESTIMULA LA TRANSLOCACIÓN DEL RECEPTOR MAS AL NÚCLEO CELULAR EN NEURONAS DE RATAS ESPONTÁNEAMENTE HIPERTENSAS Micaela Cerniello, Nadia Longo Carbajosa, Ángeles Costa, Mariela Gironacci. Introducción El clásico eje presor del sistema renina angiotensina (SRA) constituido por la enzima convertidora de angiotensina (ECA) 1, la angiotensina (Ang) II y el receptor (R) AT1 se encuentra contrabalanceado en situaciones fisiológicas por el eje depresor: ECA 2/ Ang-(1-7)/ R Mas. En la hipertensión arterial existe una sobreactivación del eje presor en detrimento del eje depresor lo que conduce a un desequilibrio entre los dos brazos del SRA. Esta menor actividad del eje depresor podría estar dada por una regulación diferencial del R Mas en la hipertensión arterial. Para evaluar esta hipótesis, en el presente trabajo se estudió la expresión y el tráfico del R Mas a nivel central en un modelo animal de hipertensión arterial. Materiales y métodos: Se obtuvieron cultivos primarios de neuronas de hipotálamo y tallo cerebral de ratas espontáneamente hipertensas (SHR) y de ratas normotensas (WKY) de 1-4 días. Las neuronas así obtenidas se utilizaron para evaluar la expresión del R Mas, por western blot y por cuantificación de la inmunofluorescencia utilizando el software Image Pro Plus, y para ensayos de colocalización. Para esto último, las células fueron incubadas con Ang-(1-7) (1µM) durante 15 o 30 min a 37°C. Un grupo de células fueron preincubadas 45 min a 37°C con una sonda fluorescente marcadora de lisosomas (Lysotracker). Luego, las neuronas fueron fijadas con paraformaldehído 4% y metanol. Se determinó el direccionamiento del R Mas a lisosomas o al núcleo celular por colocalización de este con Lysotracker o Hoechst, respectivamente, utilizando microscopía confocal. La colocalización en cada caso fue evaluada calculando los coeficientes de Manders (colocalización positiva con coeficientes de Manders mayores a 0.6). Resultados: La intensidad de fluorescencia para el R Mas fue 55,1 ± 14,7 % mayor en las neuronas de hipotálamo y tallo cerebral de SHR respecto de su control (P