DESARROLLO DE UNA METODOLOGIA DE BIOSEPARACION DE LIPASAS A PARTIR DE HONGOS Y DE DESPERDICIOS DE LA INDUSTRIA FRIGORIFICA LOCAL

LOPEZ, M. S.; BASSANI, G; FARRUGGIA, B.; PICÓ, G.

Rosario

Congreso; Reunion de la Sociedad de Biologia de Rosario; 2008

Sociedad de Biologia de Rosario

Las lipasas pueden ser utilizadas para el tratamiento y la modificación de grasas y aceites, obtención de productos farmacéuticos, cosméticos, detergentes, etc. Su purificación posee un interés adicional ya que no son producidas en nuestro país. Las fuentes de lipasas son el páncreas bovino y porcino (desperdicios de la industria frigorífica local) y ciertos hongos (Candida rugosa). El objetivo de este trabajo es aplicar los sistemas bifásicos acuosos para aislar y purificar lipasas: a partir de páncreas porcino y Candida rugosa. Para esto se estudió el perfil de reparto de ambas lipasas en sistemas bifásicos acuosos de polietilenglicol (PEG) (masa molecular 2000, 4000, 8000 y 10000) ? sal (fosfato y citrato de potasio).  Se observó que la lipasa pancreática se reparte hacia la fase rica en sal en el caso del sistema PEG /citrato de potasio mientras que presentaba mayor afinidad a repartirse a favor de la fase PEG en el sistema PEG/fosfato de potasio. El incremento del peso molecular del PEG indujo una leve disminución del coeficiente de reparto de la proteína demostrando que el reparto no estaría  gobernado por el volumen excluido del PEG. La lipasa de Candida rugosa mostró un comportamiento diferente, una alta afinidad por la fase rica en PEG. En este caso, el aumento del peso molecular del mismo disminuyó el forma significativa el coeficiente de reparto.  Debido a estas consideraciones, se eligieron los sistemas PEG2000 fosfato y citrato debido a su buena capacidad de separar lipasas. En estos, se determinó la influencia en el reparto de: concentración de NaCl, masa de homogenado y relación de los volúmenes de las fases. Se obtuvo un recupero de lipasa del orden del 90 % con un factor de purificación superior a 5, para condiciones de ausencia de NaCl  y relaciones de volúmenes de fase superior-inferior de 0,5. Los resultados obtenidos permiten concluir que la extracción líquido-líquido en sistemas bifásicos acuosos podría ser aplicado para aislar y purificar lipasas pancreática porcina y fúngicas con buenos rendimientos.   Realizado con PIP 5053/ CONICET y PICT508-06 de FonCyT.