Una mayor capacidad proliferativa y menor inducción de especies reactivas de oxígeno protegen de la fibrosis hepática a ratones knockout para SPARC

PEIXOTO E; ATORRASAGASTI C; REAL A; RODRIGUEZ M; MALVICINI M; GARCIA M; FIORE E; CORRALES F; MAZZOLINI G

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Anual de la SAIC; 2015

SPARC es una glicoproteína matricelular involucrada endiversos procesos biológicos, entre los que se encuentra la fibrogénesishepática. Hemos demostrado previamente en un modelode fibrosis hepatica avanzada inducido por tioacetamida (TAA)que la ausencia de SPARC tiene un rol protector en la generaciónde fibrosis. Con el fin de estudiar los mecanismos involucradosen la protección de la fibrosis en ausencia de SPARC se realizóun análisis de los cambios de la expresión génica utilizandola plataforma de microarrays y de la expresión de proteínasutilizando 2D-DIGE sobre muestras hepáticas provenientes deratones SPARC+/+ y SPARC-/- tratados 10 semanas con TAA.Para confirmar los resultados obtenidos se realizaron ensayosde immunohistoquímica y qPCR para PCNA a 24 horas de tratamientocon TAA. Asimismo, se obtuvieron cultivos primarios dehepatocitos provenientes de ratones SPARC+/+ y SPARC-/- y seevaluaron los niveles de especies reactivas del oxígeno (ROS)utilizando dichlorofluoresceina (DCFH) tanto en citometria comoasí también con microscopia de fluorescencia a las 3 horas dela administración de TAA. El análisis proteómico mostro un aumentode proteínas involucradas con la detoxificación de especiesreactivas del oxígeno (catalasa, peroxirredoxina-1 y glutation-STransferasaP1 y Mu1) en los ratones SPARC-/- tratados con TAA,mientras que el estudio genómico mostro que a las 10 semanasluego de tratamiento con TAA los ratones SPARC-/- presentabanun incremento en la expresión de genes relacionados con lareparación de ADN y la proliferación celular. Los ratones SPARC-/-mostraron un incremento significativo de PCNA a las 24 horastanto en los niveles de expresión génica como de proteínas.Asimismo, los niveles de especies reactivas del oxigeno fueronmenores en los hepatocitos provenientes de ratones SPARC-/-que en los SPARC+/+ tratados con TAA. La ausencia de SPARCtiene un rol protector ante un estímulo fibrogénico como la TAA.Esta protección podría deberse, al menos en parte, a una mayorcapacidad proliferativa de los hepatocitos y a una menor inducciónde especies reactivas del oxígeno.