Melatonina protege a la mucosa intestinal de los efectos oxidantes de menadiona

CARPENTIERI A, MARCHIONATTI A, ARECO V, PEREZ A, CENTENO V, TOLOSA DE TALAMONI N

Córdoba

Jornada; XII Jornadas científicas anuales SEMCO 2010; 2010

Melatonina (MEL) es una hormona que, además de regular el sistema circadiano, se le atribuyen también propiedades antioxidantes. En nuestro laboratorio observamos que MEL revierte el efecto inhibitorio de menadiona (MEN) sobre la absorción intestinal de calcio (Ca+2). El objetivo del presente trabajo fue dilucidar los mecanismos moleculares que median el efecto protector de MEL en el intestino frente a un oxidante como MEN. Para ello se utilizaron pollos de 4 semanas de edad, los cuales se dividieron en cuatro grupos: 1) controles, 2) tratados i.p. con MEN (2,5 µmol/kg de peso), 3) tratados i.p. con MEL (10 mg/kg de peso) y 4) tratados con MEL i.p. después de la administración i.p. de MEN. Se estudió la expresión génica y proteica del intercambiador Na+/Ca+2 (NCX1), de la bomba Ca-ATPasa (PMCA1) y de la calbindina D28k (CB), moléculas involucradas en el transporte transcelular del catión. El estrés oxidativo se evaluó mediante las determinaciones del contenido de glutatión (GSH) por método enzimático y la permeabilidad de la membrana mitocondrial interna por la técnica de "swelling". La actividad de las enzimas del sistema antioxidante se midió por espectrofotometría. La valoración de la apoptosis se realizó con la técnica de TUNEL, la expresión inmunocitoquímica del citocromo c y la actividad de caspasa-3. Los datos obtenidos se analizaron estadísticamente con ANOVA seguido del test de Bonferroni. Los resultados muestran que MEN disminuyó las expresiones génica y proteica de la bomba de Ca+2, las cuales se normalizaron por el posterior tratamiento con MEL. No se encontraron diferencias significativas en la expresión  de CB y NCX1 con los distintos tratamientos. También se observó que la disminución del contenido de GSH, la alteración del potencial de membrana mitocondrial y el incremento en la actividad de las enzimas superóxido dismutasa y catalasa, causados por MEN, retornaron a los valores controles después del tratamiento con MEL. La apoptosis desencadenada por MEN en las células intestinales se contrarrestó por el tratamiento con MEL, debido a que se normalizó la actividad de caspasa-3 y la inmunoexpresión de citocromo c y se disminuyó el número de células TUNEL(+). En conclusión, MEL revierte la inhibición de la absorción intestinal de Ca+2 producida por MEN contrarrestando el estrés oxidativo y la apoptosis mitocondrial y estimulando la síntesis de la bomba de calcio. Estos hallazgos sugieren que MEL podría ser una potencial droga de elección para la reversión de la alteración de la absorción intestinal de Ca+2 producida por estrés oxidativo.