Caracterización bioinformática y molecular de nuevos candidatos vacunales de Trypanosoma cruzi.

ZILIANI, M; IGLESIAS, AA; ALBA SOTO, C; GONZALEZ-CAPPA, SM; SANCHEZ DO; TEKIEL, V

Mar del Plata

Congreso; IX Congreso Argentino de Protozoologia y Enfermedades Parasitarias; 2011

Soc Arg de Protozoologia

<!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:Arial; panose-1:2 11 6 4 2 2 2 2 2 4; mso-font-alt:Arial; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:auto; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:3 0 0 0 1 0;} @font-face {font-family:Calibri; panose-1:2 15 5 2 2 2 4 3 2 4; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:auto; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:3 0 0 0 1 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin-top:0cm; margin-right:0cm; margin-bottom:10.0pt; margin-left:0cm; line-height:115%; mso-pagination:widow-orphan; font-size:11.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-ascii-font-family:Calibri; mso-fareast-font-family:Calibri; mso-hansi-font-family:Calibri; mso-bidi-font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:ES-AR; mso-fareast-language:EN-US;} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> Caracterización bioinformática y molecular de nuevos candidatos vacunales de Trypanosoma cruzi. Ziliani, M; Iglesias, A A, Alba-Soto, C D; González Cappa, S M; Sánchez, D O; Tekiel, V.   En estudios previos, realizamos ensayos de inmunización genética y desafío en ratones empleando una biblioteca de expresión de cDNA de tripomastigotes de Trypanosoma cruzi. De esta forma identificamos un grupo de 22 nuevos candidatos vacunales, compuesto por fragmentos de genes y/o marcos abiertos de lectura (ORFs). Sólo 5 de estos candidatos vacunales están anotados como proteínas en el genoma de T. cruzi: un miembro de la familia MASP (Tc00.1047053510047.60); un miembro de la familia TS (Tc00.1047053509629.10); un miembro de la familia TcTASV (Tc00.1047053511675.3); p67 (Tc00.1047053510825.30) y la proteína hipotética Tc00.1047053507003.70. La familia TcTASV fue identificada por nuestro grupo y está siendo analizada y caracterizada actualmente.  Sin embargo, no hay reportes relacionados con los genes Tc00.1047053510825.30 y Tc00.1047053507003.70. Un primer objetivo fue realizar una caracterización bioinformática y molecular de estos dos genes. Tc00.1047053510825.30 (p67) es un gen de copia única que codifica para una proteína transmembrana de 72 kDa de localización lisosomal/ endosomal con dominios hidrolasa y fosfolipasa. Posee numerosos sitios de glicosilación y alta densidad de epitopes T (7 en contexto H-2Kk) y B (25). Su ortólogo en T. brucei está implicado en el mantenimiento de la estructura del lisosoma y el crecimiento normal del estadio tripomastigote circulante. Tc00.1047053507003.70 (ph29) es una proteína de 29 kda sin función asignada, pertenece al 30% de proteínas más antigénicas de T. cruzi y posee un dominio metil-transferasa. En varios kinetoplástidos, proteínas con estos dominios participan del capping de mRNAs. Fragmentos de p67 y ph29, de 46 y 21 kda respectivamente, fueron clonados, expresados y las proteínas recombinates se utilizaron para inmunizar ratones. Los antisueros específicos se emplearon para analizar el patrón de expresión de estos genes en T. cruzi. Un segundo objetivo fue analizar la capacidad protectiva de 9 de los nuevos candidatos vacunales, seleccionados por su nivel de antigenicidad. Se inmunizaron ratones con 2 dosis de ADN plasmídico y un plásmido codificante para GM-CSF como adyuvante. En la tercera dosis se administraron las proteínas recombinantes, emulsionadas en sales de aluminio. Los animales se desafiaron con una dosis letal de tripomastigotes. Los niveles en sangre de tripomastigotes fueron menores en animales vacunados que en los controles. Estos resultados sugerirían que el protocolo de inmunización empleado permitió un control y/o disminución parcial de las parasitemias.