Patrones de motilidad en matrices de colágeno 3D de tripomastigotes de cepas de Trypanosoma cruzi con distintas características biológicas.

COSENZA, M; ALVAREZ, B; MASIP, Y; RODRIGUEZ, ME; TEKIEL V

Mendoza

Congreso; XI Congreso Sociedad Argentina de Protozoología.; 2022

SAP

BP046Patrones de motilidad en matrices de colágeno 3D de tripomastigotes de cepas de Trypanosoma cruzi con distintas características biológicas.Cosenza M1, Alvarez B1, Masip YE1,2, Rodriguez ME1,3, Tekiel V1,21Instituto de Investigaciones Biotecnológicas (IIBIO), Universidad Nacional de San Martín, San Martín, Argentina. 2Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), San Martín, Argentina. 3Dept. Of Molecular Biosciences (MBW)/The Wenner-gren Institute, Stockholm University, Stockholm, SwedenResumenCon el fin de determinar si la motilidad de T. cruzi podría relacionarse con la virulencia del parásito, en este trabajo analizamos los patrones de motilidad de tripomastigotes de una cepa poco virulenta (K98) y otra virulenta (RA) en matrices de colágeno tridimensionales. Realizamos el seguimiento de aproximadamente 900 tripomastigotes por microscopía time-lapse (2 imágenes/seg durante 1 min) y el análisis manual con el software ImageJ/Plugin/ManualTracking. Los tripomastigotes fueron clasificados como: persistentes -movimiento rectilíneo-, intermitentes -alternan movimiento rectilíneo con cambio de dirección- o tumblers -se mueven en el lugar sin desplazamiento. La cepa K98 presentó un mayor porcentaje de tripomastigotes con motilidad tumbler (98%), mientras que RA presentó un porcentaje similar de tripomastigotes tumblers e intermitentes (42% y 45%, respectivamente). Sin embargo, al aislar subpoblaciones de la cepa RA mediante un ensayo de nado libre, observamos que la fracción con alta capacidad de nado se encontraba enriquecida en tripomastigotes intermitentes (71%) y persistentes (21%), mientras que la fracción con baja capacidad presentaba una alta proporción de tripomastigotes tumbler (73%). Luego desarrollamos algoritmos bioinformáticos para evaluar otros parámetros y pudimos determinar que el ángulo de giro entre dos puntos sucesivos en el tiempo es un potencial indicador del tipo de movimiento. Los tripomastigotes persistentes presentaban ángulos inferiores a 40°, mientras que los tumblers tenían ángulos superiores a 120°. Asimismo, generamos histogramas y gráficos que reflejan visualmente el comportamiento de estas poblaciones/cepas de T. cruzi. Concluimos que las velocidades, ángulos y el desplazamiento de los tripomastigotes son características del tipo de motilidad de los parásitos y no difirieron entre cepas ni en las subpoblaciones aisladas. Próximamente evaluaremos la virulencia de subpoblaciones de una misma cepa con distinto tipo de motilidad.