Génomica y Proteómica de la lesión vascular

CASTRO, CLAUDIA

Buenos Aires

Congreso; Mesa redonda: Hipertensión y lesión de la pared vascular. XV Congreso Argentino de Hipertensión Arterial; 2008

Sociedad Argentina de Hipertensión Arterial

La arterosclerosis es una enfermedad de origen multifactorial y la hipercolesterolemia es uno de los factores de riesgo involucrado en el desarrollo de la placa de ateroma. Los fenómenos que dan inicio a la placa no están completamente establecidos, pero se relacionan con la penetración y acumulación subendotelial de colesterol. Con el fin de estudiar los cambios en la expresión de genes sensibles a la hipercolesterolemia utilizamos la técnica de microarrays de cDNA de alta densidad en un modelo de arteriosclerosis experimental inducida por dieta aterogénica. Esta técnica nos permitirió obtener un perfil transcripcional que refleja los cambios que se producen en la pared arterial durante los primeros estadios del desarrollo de la placa de ateroma. Ratones deficientes en apolipoproteína E (apoE -/-) recibieron una dieta control o dieta aterogénica durante dos o siete días al final de los cuales se sacrificaron. La porción del cayado aórtico se utilizó para la extracción de RNA total de cada grupo de animales. Se prepararon cRNA biotinilados (PROGENIKA) y se hibridaron en microarrays Affymetrix MOE430 de ratón. Las imágenes se analizaron con GeneChip Expression Análisis (Affymetrix Microarray Suite 5.0). De los 14484 genes con secuencia completa representados en el chip, se seleccionaron aquellos cuyo nivel de expresión varió al menos 1.5 veces en cualquiera de las condiciones estudiadas para incluirlos en el análisis de agrupamiento jerárquico utilizando el programa JExpress. Las funciones biológicas de los genes fueron asignadas utilizando las bases de datos de GENE ONTOLOGY y GeneCardsTM. Tras una rigurosa selección identificamos 311 genes que estaban regulados al alza o a la baja, en el cayado aórtico de animales por la dieta hipercolesterolémica. La mayoría de estos genes están funcionalmente relacionados y participan en diversos procesos, tales como respuesta inmune, metabolismo, proliferación y adhesión celular, trascripción génica, transporte, cascada del complemento. De esta manera demostramos que la exposición corta a una dieta rica en colesterol induce la expresión basal de mRNA de genes involucrados en el inicio de la formación de la placa de ateroma. (Castro C, Campistol JM, Barettino D, and Andrés V. Transcriptional profiling of early onset diet-induced atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice. Frontiers in Bioscience 2005. 10:1932-45 ).