“Método de medición de impedancia eléctrica in vitro de bajo ruido, utilizable para diagnóstico de células cancerígenas”.

M. TADEY, M. GARCÍA, Y F. BONETTO.

Mendoza

Congreso; V Congreso Argentino de Física Médica – SAFIM; 1999

MÉTODO DE MEDICIÓN DE IMPEDANCIA ELÉCTRICA IN VITRO DE BAJO RUIDO UTILIZABLE PARA DIAGNÓSTICO DE CÉLULAS CANCERÍGENAS________ Mariana Tadey, Matías García, Fabián Bonetto Instituto Balseiro, Centro Atómico Bariloche, Río Negro (8400), Argentina E-ma¡l:bonetto@cab.cnea.gov.ar Introducción: Las células epiteliales cultivadas in vitro forman uniones estrechas entre sí generando una cierta polaridad morfológica y funcional en el tejido formado. Una de las funciones principales de los epitelios es la permeabilidad iónica. El flujo de iones circula principal­mente por tres vías, de las cuales dos son transcelulares (entrando a través de la membrana basal y saliendo por la apical, o entrando a través de la lateral y saliendo por la apical), y el otro es paracelular (a través del espacio intercelular y de las uniones estrechas). Un método comunmente utilizado para el estudio de las propiedades del transporte iónico en células epiteliales es la medición de la resistencia de una capa celular usando corriente continua (DC).   Materiales, Métodos y Resultados: Para la medición control utilizamos un tipo de células de pulmón de feto humano que las provee la compañía ATCC. Estas células son las WI38 (sanas, con una morfología del tipo fibroblas­to, cat. CCL-75) y las WI38VA13 (transformadas cuya morfología es del tipo epitelial, cat. CCL-75.1), obtenidas por ingeniería genética infectan­do las WI38 con el virus tumoral SV-40. Con estas células nos aseguramos tener un cultivo 100% de células normales y clones entre sí, y otro culti­vo 100% de células cancerígenas a los cuales les medimos la impedancia eléctrica para comparar con la medición proveniente de la biopsia. La configuración básica del método utilizado consiste en: Una caja de Petri modificada con un sistema de dos electrodos, el cultivo de células al cual se le realizará la medición de impedancia eléctrica, un sistema para man­tener el cultivo a 37°C y pH constante, un generador de onda, un ampli­ficador lock-in y un sistema automático de adquisición de datos. La mod­ificación de la caja de Petri consiste en la impresión de dos electrodos de oro sobre el fondo de la misma. Un electrodo pequeño cuya área es de aproximadamente (100_m)2 y otro electrodo grande, cuya área ocupa alrededor de un quinto de! área total de la caja de Petri. Conclusiones: En base a los resultados obtenidos con el sis­tema emulador de células concluimos que la mejora introducida usando dos amplificadores lock-in junto con el sistema de frecuencia dual mejo­ra en unos 30dB la relación señal-ruido. Este valor está apenas por deba­jo del valor teórico esperado de 40dB.