Produccion de penicilin acilasa de aislamientos del genero Penicillium obtenidos de suelos de la Argentina

SILVESTRO L.B., MURRAY A.P., STENGLEIN S.A., ARROYO M., ACEBAL C., VELASCO-BUCHELI R., DE LA MATA I. & MORENO M.V.

Congreso; CAMAyA; 2015

Penicillium sp. es un género cosmopolita cuyas especies soncapaces de desarrollarse sobre diversos tipos de sustratos. Desde el punto devista biotecnológico son de interés, ya que son capaces de sintetizarantibióticos o precursores de los mismos y una amplia gama de enzimashidrolíticas, tales como proteasas, lipasas, celulasas y acilasas. Las penicilinaacilasas están involucradas en la producción industrial de antibióticosβ-lactámicos (penicilinas y cefalosporinas) semisintéticos, a partir depenicilinas y cefalosporinas naturales, por tal razón resulta relevante elhallazgo de nuevas enzimas con mayor poder catalítico. El objetivo del presentetrabajo fue detectar la presencia de enzimas penicilina acilasas en aislamientosdel género Penicillium obtenidos de suelos de Argentina. Para ello, separtió de una colección de 50 aislamientos; las especies empleadas fueron Penicillium aethiopicum (3), P.griseofulvum (5), P. kananaskense (1), P. lilacinum (4), P. paraherquei (3),P. pinophilum (Talaromyces pinophilus) (10), P. meridianum (4),P. purpurogenum (T. purpurogenus) (18), T. sayulitensis (2).Cada aislamiento se creció en placas de Petricon agar extracto de malta. Los cultivos fueron incubados durante 2 semanas a 21+2°Ccon alternancia de luz/oscuridad de 12 h. Para la obtención de lasuspensión de esporas, a cada placa de Petri se le adicionaron 15 mL desolución estéril de Tween 80®, se raspó el micelio con bisturí ey se filtró a través deuna gasa estéril. Posteriormente, en Erlenmeyers de 250 mL fueron inoculadospor duplicado 4 x 104 esporas en 50 mL de medio líquido, y seincubaron durante 3 días en agitador orbital a 28ºC y 180 rpm.  El sobrenadante enzimático obtenido fueempleado para el ensayo espectofotométrico de actividad penicilina acilasa,empleando como sustratos penicilina V y penicilina G y la posterior cuantificación del 6-APA (núcleoβ-lactámico liberado) mediante p-dimetilaminobenzaldehído. Del total de losaislamientos evaluados se observó que las especies que reflejaron actividad penicillinaV acilasa fueron: P. aethiopicum (2), P.griseofulvum (2), P. meridianum (1),P. paraherquei (2), P. pinophilum (1) y  P. purpurogenum (8). Igualmente, las especis que presentan actividad  penicillina G acilasa fueron: P. aethiopicum (1), P. griseofulvum (1), P. meridianum (3), P. pinophilum (2) y  P. purpurogenum (5). Los mayores valorespenicilina G acilasa lo muestran P.paraherquei y P. purpurogenum, y en el caso de penicilina V acilasa fueron P. aethiopicum, P. griseofulvum y P. meridianum. Dichas especies poseen buenas perspectivas paraser empleadas en la hidrólisis de penicilinas, así como pueden sereventualmente empleadas en la producción de antibióticos β-lactámicos, siendo latentela importancia para tal fin que reside en el empleo de especies cosmopolitas frecuentesen suelos de Argentina.