Plasticidad de receptores ionotrópicos de GABA en linfocitos

DIONISIO, L.; BOUZAT, C.; ESANDI, M.C.

Congreso; LVI Reunión Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Reunión Anual Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS), II Congreso Nacional Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laboratorio (AACYTAL); 2011

La plasticidad de los receptores de GABA ha sido ampliamente estudiada en sistema nervioso central. Las neuronas pueden modificar el número y la composición de sus receptores en respuesta a diferentes estímulos como la exposición a drogas y a cambios en los niveles hormonales. Anteriormente, nuestro grupo determinó la presencia de un sistema GABAérgico completo en linfocitos humanos de sangre periférica, con características similares al descripto en neuronas. En este trabajo nos propusimos determinar si este sistema no-neuronal también exhibe la propiedad de plasticidad. Para ello, estudiamos los cambios ocurridos en el nivel de expresión de subunidades de los receptores ionotrópicos de GABA de células Jurkat, línea celular derivada de linfocitos T leucémicos humanos.Mediante PCR de punto final, determinamos que estas células expresan las subunidades α1, β3, δ, γ2 y ρ2 de los receptores de GABA. Con el fin de estudiar plasticidad, expusimos las células a 100 µM de GABA en diferentes periodos de tiempo y utilizando PCR en tiempo real, detectamos aumentos significativos en los niveles de ARNm de las subunidades α1, γ2 y ρ2 a las 15 hs de exposición y una disminución de los mismos a las 40 hs. Para evaluar si estos cambios en el ARNm se traducían en cambios a nivel de proteína, realizamos experimentos de western blot para la subunidad α1. Observamos un aumento de la proteína tanto a las 15 como a las 40 hs de exposición respecto al control. Finalmente evaluamos si estas subunidades conformaban receptores funcionales en estas células mediante la técnica de patch clamp. Efectivamente, obtuvimos registros de corrientes macroscópicas y éstos se observaron en mayor porcentaje (21%) a las 15 hs de exposición de las células a GABA, respecto a 0 hs (6%) y 40 hs (8%).Concluimos que los receptores de GABA presentes en linfocitos exhiben plasticidad al igual que los receptores neuronales, y que esta propiedad podría ser importante en la modulación de la respuesta inmune.