Regulación de volumen en hepatocitos de goldfish

PAFUNDO, D.E., PEREZ-RECALDE, M.; FAILLACE, M. P., KRUMSCHNABEL, G., SCHWARZBAUM, P. J.

Mar del Plata

Congreso; Joint Congress of biochemical societies; 2004

En células hepáticas, la exposición a medios hipotónicos induce un rápido aumento de volumen, salida de ATP y disminución regulatoria de volumen (RVD). Se ha reportado que el ATP secretado, y la adenosina que resulta de su desfosforilación extracelular, pueden interactuar con receptores P1 (adenosina) y P2 (ATP) para modular el RVD. En el goldfish, a diferencia del resto de los vertebrados, los hepatocitos sometidos a medios hipotónicos no presentan RVD. El objetivo del presente estudio es verificar si en hepatocitos de esta especie el RVD puede ser inducido y modulado por nucleótidos y adenosina extracelulares. El volumen celular fue estimado por microscopía de fluorescencia. El RVD fue evaluado a partir de su velocidad inicial (vRVD) y a los 40 min de iniciada la regulación volumétrica (RVD40) Resultados: en presencia de medio 190 mosM (HYPO), se observó un aumento de volumen pero ausencia de RVD, mientras que HYPO + 5 mMATP indujeron un RVD de 1.83 ± 0.24  (vRVD) y 37.5 ± 3.9  (RVD40). En presencia de HYPO y concentraciones variables de ATPgS (análogo no hidrolizable del ATP), tanto el vRVD como el RVD40 mostraron un aumento dependiente de la concentración del nucleótido (0-50 µM). En medios HYPO + 5 µM ATPgS, el agregado de 100 mM de suramina y cibacron blue (antagonistas de receptores P2) causó una disminución del RVD del 87% (vRVD) y 63% (RVD40). Por otro lado, en presencia de HYPO + 5 µM ATPgS el agregado de 5 µM adenosina redujo el RVD en 53% (vRVD) y 25% (RVD40); esta inhibicion fue revertida por 100 µM 8-SPT (antagonista de receptores P1). Conclusiones: si bien en hepatocitos de goldfish sometidos a un medio hipotónico no se verifica RVD, este puede ser activado por ATP y ATPgS e inhibido por la adenosina. Ambos efectos están mediados por receptores P. Con subsidios de F. Antorchas, UBA, CONICET, ANPCyT (11017)  y FWF Austria (P16154-B06)