Respuesta in vitro de un aislado de Leishmania (Viannia) braziliensis de un paciente con fracaso terapéutico a drogas leishmanicidas

MEJÍA MONTAÑO, ELVIA; ARREGUEZ, MARÍA LAURA; LAUTHIER JUAN JOSÉ; RUYBAL, PAULA; QUIPILDOR, MARCELO; BONO, MANUELA; MARCO, JORGE DIEGO; CARRER, DOLORES; BARROSO, PAOLA ANDREA

CABA

Simposio; XXI Simposio Internacional Mundo Sano; 2023

Fundación Mundo Sano

El fracaso de tratamiento (FT) con Glucantime (Gl) y Anfotericina B (Anf B) ha sido reportado en los últimos años en pacientes con leishmaniasis tegumentaria Americana (LTA). El FT tiene un origen multifactorial en donde están involucrados factores del huésped, características del tratamiento (calidad de la droga, dosis, duración de la terapia) y características del parásito (resistencia natural o primaria y la resistencia secundaria o adquirida durante el tratamiento). El objetivo de este estudio fue evaluar la susceptibilidad a drogas leishmanicidas de parásitos aislados de lesión de un paciente con LTA con FT. La tipificación del aislado se realizó mediante PCR y secuenciación del gen HSP70. Para medir la susceptibilidad in vitro, macrófagos de la línea celular Raw 264.7 fueron infectados con promastigotes e incubados a 34°C, 5% CO 2 durante 5 días. Luego, los cultivos fueron tratados con diferentes concentraciones (factor de dilución 2) de Gl (30 a 480μg/ml), Anf B (0,01 a 0,35 μg/ml) y Miltefosina (Mil) (0.12 a 4 μM) durante 48hs. Finalizada la incubación, las placas fueron coloreadas con Tinción 15. El número de amastigotes por macrófago se cuantificó bajo microscopio óptico (100X). Los valores de IC 50 se calcularon con GraphPad Prism y se comparó el número de amastigotes por macrófago entre tratados vs. el control con el t-test. Los parásitos aislados mostraron 100% de homología con la cepa de referencia de L. (V.) braziliensis (MHOM/BR/75/M2903). Gl (480μg/ml), Anf B (0,35 μg/ml) y Mil (4μM) inhibieron significativamente el crecimiento de los amastigotes intracelulares con respecto al control (p < 0,05) luego de 48 hs de incubación. Los valores de IC 50 para Gl, Anf B y Mil fueron 509,4μg/ml (R2:0,92), 0,455μg/ml (R2: 0,97), 6,567μM (R2: 0,98) respectivamente. Los parásitos de L. (V.) braziliensis aislados de un paciente con FT mostraron una respuesta baja al Gl, Anf B y Mil in vitro.