ESTUDIO POR ESPECTROSCOPIA DE UV Y DICROISMO CIRCULAR DIMERIZACION LA ANFOTERICINA B Y SU INTRACCION CON LA ALBUMINA SERICA

ROMANINI, DIANA; AVALLE, GABRIELA; PICO, GUILLERMO

Rosario

Congreso; XVII Reunión anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 1997

Sociedad de Biología de Rosario

La anfotericina B (AMP) es el único antibiótico poliénico de administración por vía endovenosa. Su unión a las proteínas plasmáticas y su baja solubilidad condiciona su potencia farmacológica. Se estudió el equilibrio de dimerización de la AMP en medio acuoso bajo diferentes condiciones de pH, temper atura y en presencia de albúmina humana (AH) empleando espectroscopía de UV y dicroismo circular (CD). Se encontró que AMP  dímero posee dos bandas ópticamente activas de dicroismo circular a 330 y 351nm. La banda de 330nm permitió cuantificar el equilibrio monómero-dímero, encontrándose un valor de concentración de AMP de 0,5 µM, el cual existen un 50% entre dímero y monómero. La temperatura aumentó sensiblemente éste valor a 5 µM , a pH 5 prevaleció la formación de dímero y a pH 10 la del monómero, obteniéndose valores positivos de )H y )S para la formación del dímero . El sistema estudiado por espectroscopía de UV-vis  mostró para el monómero bandas a 395 y 375 nm, mientras que el dímero presentó una banda a 340nm, la banda de absorción a 390 nm fue empleada para cuantificar el equilibrio  monómero-dímero obteniéndose valores de constante  de  dimerización y parámetros termo-dinámicos similares a los obtenidos por CD. En presencia de albúmina humana se observó una disminución de la banda de absorción del monómero a 395 y 375 nm por lo que se concluye que solamente el monómero se une a la proteína; las bandas ópticamente activas de AMP dímero sufrieron una importante disminución en presencia de AH, lo que confirma la disociación del dímero en monómero para unirse a la proteína, (ya que solamente el dímero es ópticamente activo), confirmándose los resultados hallados por dicroismo  circular. Cabe destacar que la solubilidad del AMP en medio acuoso es mucho menor que la informada por otros autores , siendo éste valor  dependiente del pH y la temperatura.